Zprávy CEM (SZÚ, Praha)
2000; 9(8): 322-232.
Záchyt kmene Staphylococcus aureus s
vysokou odolností vůči chloru z vody plaveckého stadionu
__________________________________________________________________________________________
Jana Kneiflová,
Květa Hůrková, Eva Šimečková, Petr Petráš
Dne 14.6.2000 proběhla
běžná hygienická kontrola strakonického plaveckého bazénu, spojená s odběrem
vzorků vody. Vzorky byly zpracovány standardním způsobem, tj. po filtraci
100 ml vody na membránovém filtru byl filtr kultivován na Baird-Parkerově
agaru 48 hodin při 37 °C. Ve vzorcích byla zjištěna přítomnost
kolonií Staphylococcus aureus. Okresní hygienická stanice nařídila
nápravná opatření a následnou kontrolu.
Při kontrole, která byla
provedena 26.6.2000, byly opět odebrány vzorky vody. Na místě byla stanovena
koncentrace volného chloru, která se pohybovala kolem hodnoty 1,5 mg.ml-1.
(Běžně používaná koncentrace nepřekračuje hodnotu 0,5 mg.ml-1). Provozovatel bazénu se snažil
nadměrnou chlorací zlikvidovat ve vodě vše živé, areál bazénu nebyl v té době v
provozu pro veřejnost.
Bylo velkým překvapením,
že přes vysokou koncentraci chloru byly ve vodě opět zachyceny bakterie Staphylococcus
aureus. OHS nařídila další opatření, včetně změny způsobu dezinfekce vody
(UV záření, ozonizace). Po provedení dalších technických opatření na úpravně
vody, nebyl při další kontrole v červenci již Staphylococcus aureus v
bazénové vodě nalezen.
Kmen byl přes oddělení
klinické mikrobiologie Okresní nemocnice Strakonice poslán do NRL pro
stafylokoky do SZÚ - CEM. V NRL bylo zjištěno, že se jedná o fágově
netypovatelný kmen, který neprodukuje alfa, beta ani delta-hemolyzin. Kmen je výrazným producentem
slizu a silně produkuje toxin syndromu toxického šoku
TSST-1. Ke všem 12 sledovaným antibiotikům (oxacilin, erythromycin, ko-trimoxazol,
chloramfenikol, tetracyklin, klindamycin, gentamicin, amoxicilin/klavulanová
kyselina, teikoplanin, vankomycin, ciprofloxacin, rifampicin) byl kmen citlivý.
Ke stanovení citlivosti k vybraným dezinfekčním
prostředkům byl kmen, označený "Strakonice", předán do NRL pro
dezinfekci a sterilizaci SZÚ - CEM.
Suspensní mikrometodou byly stanovena citlivost kmene k následujícím dezinfekčním přípravkům, které byly vybrány tak, aby zahrnovaly základní chemické skupiny látek a přípravky používané v praxi:
Chloramin
B (chlor),
Jodonal
B ( jodofor),
Dosilin
S (kvarterní amoniová sloučenina),
Orthosan
BF 12 (benzylchlorfenol),
Incidur (aldehydy),
Sekusept
pulver (peroxosloučenina),
Chiroseptol
(aldehydy a kvarterní amoniová sloučenina) a
Dismozon
pur ( peroxosloučenina).
Suspensní mikrometoda je modifikovaná standardní suspensní metoda, při které expozice mikrobů i kultivace probíhají v titračních mikrodestičkách při objemu 0,1 ml roztoku nebo kultivačního media. Přípravky se ředí destilovanou vodou, s koeficientem 3 tj. v řadě 10%, 3,3%, 1,1%, 0,4%, 0,12%, atd Základní expozice je 10 minut. Denzita mikrobů ve výchozích 20 hodinových bujonových kulturách byla 107-108CFU/ml. Pro srovnání byl testován také sbírkový kmen Staphylococcus aureus Mau 43/60 (CNCTC).
Z výsledků
vyplývá, že kmen „Strakonice“ je mimořádně odolný k působení chloru z Chloraminu
B. Při 10 minutové expozici byl usmrcen v koncentraci Chloraminu B
1,1%, při 30 minutové expozici v koncentraci 0,04%, zatímco sbírkový kmen S.
aureus MAU
43/60 byl usmrcen v koncentraci 0,0015% za 10 minut.
K působení
ostatních testovaných dezinfekčních přípravků vykazoval kmen „Strakonice“ obdobnou
citlivost jako jiné druhy bakterií.
Výsledky jsou uvedeny v tabulkách 1 a 2,
resp. na grafu
1.
Tabulka 1: Účinnost
vybraných dezinfekčních prostředků na STAPHYLOCOCCUS aureus – kmen „Strakonice“
Expozice [min] |
Minimální baktericidní
koncentrace [%] |
|||||
Chloramin B |
Jodonal B |
Dosilin S |
OBF 12 |
Incidur |
Sekusept forte |
|
2 |
3,3 |
0,12 |
0,014 |
0,12 |
0,12 |
0,014 |
5 |
1,1 |
0,12 |
0,014 |
0,12 |
0,12 |
0,014 |
10 |
1,1 |
0,12 |
0,0045 |
0,12 |
0,12 |
0,014 |
30 |
0,04 |
0,12 |
0,0045 |
0,12 |
0,12 |
0,014 |
Tabulka 2: Účinnost
vybraných dezinfekčních prostředků
na S. aureus – kmen
„Strakonice“ a sbírkový kmen Mau
43/60 (CNCTC)
Kmen |
Minimální baktericidní koncentrace [%] při
expozici 10 min. |
|||||
Chloramin B |
Jodonal B |
Dosilin S |
OBF 12 |
Incidur |
Sekusept forte |
|
Strakonice |
1,1 |
0,12 |
0,0045 |
0,12 |
0,12 |
0,014 |
Mau 43/60 |
0,0015 |
0,4 |
0,0045 |
0,4 |
0,4 |
0,04 |
Pro
ilustraci je v grafu 2 je zaznamenána
citlivost 50 kmenů S. aureus k některým dezinfekčním prostředkům.
Z výsledků vyplývá, že nejcitlivější
kmeny jsou asi 100x citlivější než kmeny nejodolnější. Nejúčinnější
přípravek byl Chloramin B, který i nejodolnější kmeny usmrtil
v koncentraci téměř 50x menší než je koncentrace doporučená k používání.
Testovaný kmen "Strakonice" byl nad spodním limitem doporučených
koncentrací.
Výsledky laboratorních suspenzních pokusů nelze mechanicky přenášet do praxe,
naznačují však rozdíly
mezi účinností jednotlivých dezinfekčních přípravků a citlivostí bakteriálních druhů a kmenů.
Při interpretaci výsledků je nutno
počítat s tím, že výsledky dezinfekce
v praxi jsou
vždy horší než výsledky suspenzních pokusů.
ZÁVĚR
Ve vodě plaveckého stadionu byl zachycen kmen Staphylococcus
aureus s mimořádnou odolností vůči chloru. Při laboratorním testu s
Chloraminem B byl při 10 minutové expozici dekontaminován až při koncentraci
1,1% (t.j. cca 2,7 mg chloru.ml-1), což je hodnota asi 700x vyšší
než u srovnávacího kmene S.aureus Mau 43/60 (CNCTC) a asi 100x vyšší než
mají nejodolnější testované kmeny tohoto druhu. K ostatním testovaným dezinfekčním přípravkům vykazoval kmen
„Strakonice“ srovnatelnou citlivost jako jiné druhy bakterií. Studium
vlastností tohoto výjimečného kmene dále pokračuje.
RNDr.
Jana Kneiflová, CSc.; NRL pro dezinfekci a sterilizaci, SZÚ - CEM
ing.
Květa Hůrková; OHS Strakonice
Pharm.Dr.Eva
Šimečková; oddělení klinické mikrobiologie ON Strakonice
RNDr.
Petr Petráš, CSc.; NRL pro stafylokoky, SZÚ - CEM