Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2000; 9(8): 322-232.

 

Záchyt kmene Staphylococcus aureus s vysokou odolností vůči chloru z vody plaveckého stadionu                           

__________________________________________________________________________________________

Jana Kneiflová, Květa Hůrková, Eva Šimečková, Petr Petráš

 

 

Dne 14.6.2000 proběhla běžná hygienická kontrola strakonického plaveckého bazénu, spojená s odběrem vzorků vody. Vzorky byly zpracovány standardním způsobem, tj. po filtraci 100 ml vody na membránovém filtru byl filtr kultivován na Baird-Parkerově agaru 48 hodin při 37 °C. Ve vzorcích byla zjištěna přítomnost kolonií Staphylococcus aureus. Okresní hygienická stanice nařídila nápravná opatření a následnou kontrolu.

 

Při kontrole, která byla provedena 26.6.2000, byly opět odebrány vzorky vody. Na místě byla stanovena koncentrace volného chloru, která se pohybovala kolem hodnoty 1,5 mg.ml-1. (Běžně používaná koncentrace nepřekračuje hodnotu 0,5 mg.ml-1). Provozovatel bazénu se snažil nadměrnou chlorací zlikvidovat ve vodě vše živé, areál bazénu nebyl v té době v provozu pro veřejnost.

 

Bylo velkým překvapením, že přes vysokou koncentraci chloru byly ve vodě opět zachyceny bakterie Staphylococcus aureus. OHS nařídila další opatření, včetně změny způsobu dezinfekce vody (UV záření, ozonizace). Po provedení dalších technických opatření na úpravně vody, nebyl při další kontrole v červenci již Staphylococcus aureus v bazénové vodě nalezen.

 

Kmen byl přes oddělení klinické mikrobiologie Okresní nemocnice Strakonice poslán do NRL pro stafylokoky do SZÚ - CEM. V NRL bylo zjištěno, že se jedná o fágově netypovatelný kmen, který neprodukuje alfa, beta ani delta-hemolyzin. Kmen  je výrazným producentem slizu a silně produkuje toxin syndromu toxického šoku TSST-1. Ke všem 12 sledovaným antibiotikům (oxacilin, erythromycin, ko-trimoxazol, chloramfenikol, tetracyklin, klindamycin, gentamicin, amoxicilin/klavulanová kyselina, teikoplanin, vankomycin, ciprofloxacin, rifampicin) byl kmen citlivý.

 

Ke stanovení citlivosti k vybraným dezinfekčním prostředkům byl kmen, označený "Strakonice", předán do NRL pro dezinfekci a sterilizaci SZÚ - CEM.

 

Suspensní  mikrometodou  byly  stanovena  citlivost  kmene k následujícím dezinfekčním přípravkům, které byly vybrány tak, aby zahrnovaly základní chemické skupiny látek a přípravky používané v praxi:

 

Chloramin B (chlor),

Jodonal B ( jodofor),

Dosilin S (kvarterní amoniová sloučenina), 

Orthosan BF 12  (benzylchlorfenol),

Incidur  (aldehydy), 

Sekusept pulver (peroxosloučenina), 

Chiroseptol (aldehydy a kvarterní amoniová sloučenina) a

Dismozon pur ( peroxosloučenina).

Suspensní    mikrometoda    je    modifikovaná    standardní suspensní  metoda,   při  které  expozice   mikrobů  i  kultivace probíhají v titračních mikrodestičkách  při objemu 0,1 ml roztoku nebo  kultivačního  media.  Přípravky  se  ředí  destilovanou  vodou,  s koeficientem  3 tj. v  řadě  10%, 3,3%, 1,1%,  0,4%,  0,12%, atd  Základní expozice je 10 minut. Denzita mikrobů ve výchozích 20 hodinových bujonových kulturách byla 107-108CFU/ml. Pro srovnání byl testován také sbírkový kmen Staphylococcus aureus Mau 43/60 (CNCTC).

 

Z výsledků vyplývá, že kmen „Strakonice“ je mimořádně odolný k působení chloru z Chloraminu B. Při 10 minutové expozici byl usmrcen v koncentraci Chloraminu B 1,1%, při 30 minutové expozici v koncentraci 0,04%, zatímco sbírkový kmen S. aureus MAU 43/60 byl usmrcen v koncentraci 0,0015% za 10 minut.

 

K působení ostatních testovaných dezinfekčních přípravků vykazoval kmen „Strakonice“ obdobnou citlivost jako  jiné druhy bakterií. Výsledky jsou uvedeny v tabulkách 1 a 2, resp. na grafu  1.

 

Tabulka 1:  Účinnost vybraných dezinfekčních prostředků  na STAPHYLOCOCCUS  aureus – kmen „Strakonice“

 

Expozice [min]

Minimální baktericidní koncentrace [%]

Chloramin B

Jodonal B

Dosilin S

OBF 12

Incidur

Sekusept forte

2

3,3

0,12

0,014

0,12

0,12

0,014

5

1,1

0,12

0,014

0,12

0,12

0,014

10

1,1

0,12

0,0045

0,12

0,12

0,014

30

0,04

0,12

0,0045

0,12

0,12

0,014

 

 

 

Tabulka 2:  Účinnost vybraných dezinfekčních prostředků  na        S. aureus – kmen „Strakonice“ a sbírkový kmen Mau 43/60 (CNCTC)

 

 

Kmen

Minimální baktericidní koncentrace [%] při expozici 10 min.

Chloramin B

Jodonal B

Dosilin S

OBF 12

Incidur

Sekusept forte

Strakonice

1,1

0,12

0,0045

0,12

0,12

0,014

Mau 43/60

0,0015

0,4

0,0045

0,4

0,4

0,04

 

 

 

Pro ilustraci je v grafu 2 je zaznamenána citlivost 50 kmenů S. aureus k některým dezinfekčním prostředkům. Z výsledků vyplývá, že nejcitlivější  kmeny jsou asi 100x citlivější než kmeny nejodolnější. Nejúčinnější přípravek byl Chloramin B, který i nejodolnější kmeny usmrtil v koncentraci téměř 50x menší než je koncentrace doporučená k používání. Testovaný kmen "Strakonice" byl nad spodním limitem doporučených koncentrací.

 

  

Výsledky  laboratorních suspenzních  pokusů nelze mechanicky přenášet  do praxe,  naznačují  však   rozdíly  mezi  účinností jednotlivých  dezinfekčních přípravků  a citlivostí bakteriálních druhů a kmenů. Při interpretaci  výsledků je nutno počítat s tím, že  výsledky  dezinfekce  v  praxi  jsou  vždy horší než výsledky suspenzních pokusů.

 

 

ZÁVĚR

 

Ve vodě plaveckého stadionu byl zachycen kmen Staphylococcus aureus s mimořádnou odolností vůči chloru. Při laboratorním testu s Chloraminem B byl při 10 minutové expozici dekontaminován až při koncentraci 1,1% (t.j. cca 2,7 mg chloru.ml-1), což je hodnota asi 700x vyšší než u srovnávacího kmene S.aureus Mau 43/60 (CNCTC) a asi 100x vyšší než mají nejodolnější testované kmeny tohoto druhu. K ostatním testovaným dezinfekčním přípravkům vykazoval kmen „Strakonice“ srovnatelnou citlivost jako jiné druhy bakterií. Studium vlastností tohoto výjimečného kmene dále pokračuje.

 

 

RNDr. Jana Kneiflová, CSc.; NRL pro dezinfekci a sterilizaci, SZÚ - CEM

ing. Květa Hůrková; OHS Strakonice

Pharm.Dr.Eva Šimečková; oddělení klinické mikrobiologie ON Strakonice

RNDr. Petr Petráš, CSc.; NRL pro stafylokoky, SZÚ - CEM