Zprávy CEM (SZÚ,
Praha) 2001; 11(2):91-93.
![]()
Helena Žemličková, Pavla
Urbášková
celkové hodnocení identifikací
Celkem byly rozeslány vzorky 110 laboratořím. 109 laboratoří odeslalo výsledek
do závěrečného termínu. Za 4 vzorky mohly laboratoře získat maximálně 8 bodů.
Bodování bylo provedeno ve stupnici 2, 1, 0 a -1 bod.
Graf 1: Celkový výsledek laboratoří v
identifikacích ehk-280

Maximálního počtu bodů dosáhlo
106, tj. 97,2% laboratoří. Limit pro úspěšné absolvování byl 7,384 bodů,
(aritmetický průměr minus dvě směrodatné odchylky,
tj. 7,954 – (2x0,285) = 7,384). Tohoto limitu
dosáhlo 106 laboratoří, 3 laboratoře tento limit nesplnily.
Výsledky u jednotlivých vzorků
|
Vzorek 1: Izolát z
hemokultury od pacienta z JIP. |
|
Odpověď: Pseudomonas aeruginosa |
|
identifikace |
frekvence |
body |
procento |
|
Pseudomonas aeruginosa |
109 |
2 |
100% |
|
Celkem |
109 |
|
100% |
Z 20 laboratoří s nejvyšším dosaženým počtem bodů za minulý rok uvedlo správný výsledek 20 laboratoří. Vzorek je možno hodnotit.
|
Vzorek 2: Výtěr z krku od
16letého pacienta s pharyngitidou. |
|
Odpověď: Arcanobacterium
haemolyticum Vzorek
dále obsahoval: Neisseria lactamica, viridující streptokok |
|
identifikace |
frekvence |
body |
procento |
|
Arcanobacterium
haemolyticum |
106 |
2 |
97,2% |
|
Arcanobacterium species |
1 |
1 |
0,9% |
|
Patogen nenalezen |
2 |
0 |
1,8% |
|
Celkem |
109 |
|
100% |
Z 20 laboratoří s nejvyšším dosaženým počtem bodů za minulý rok uvedlo správný výsledek 19 laboratoří. Vzorek je možno hodnotit.
|
VZOREK 3: Stolice od 7letého dítěte s podezřením na
apendicitidu. |
|
Odpověď: Yersinia enterocolitica Vzorek
dále obsahoval: Escherichia coli, Enterococcus faecalis |
|
identifikace |
frekvence |
body |
procento |
|
Yersinia
enterocolitica |
109 |
2 |
100% |
|
Celkem |
109 |
|
100% |
Z 20 laboratoří s nejvyšším dosaženým počtem bodů za minulý rok uvedlo správný výsledek 20 laboratoří. Vzorek je možno hodnotit.
|
Vzorek 4: Izolát z moče od pacienta s urosepsí. |
|
Odpověď: Proteus mirabilis |
|
identifikace |
frekvence |
body |
procento |
|
Proteus mirabilis |
109 |
2 |
100% |
|
Celkem |
109 |
|
100% |
Z 20 laboratoří s nejvyšším dosaženým počtem bodů za minulý rok uvedlo správný výsledek 20 laboratoří. Vzorek je možno hodnotit.
Všechny zúčastněné laboratoře izolovaly a správně určily vzorky 1, 3, a 4. Díky typické fenotypické charakteristice nejsou ve většině případů Pseudomonas aeruginosa a Proteus mirabilis zdrojem obtíží při identifikaci. Vzorek č. 3 – Yersinia enterocolitica patří k relativně méně frekventovaným patogenům, izolovaným od pacientů s gastrointestinálními obtížemi. I přesto se všem laboratořím zdařila izolace i identifikace. Y. enterocolitica byla zasílána v EHK-199, kde byla správně určena 99% laboratořemi. Příznaky yersiniové infekce mohou probíhat pod obrazem akutní appendicitidy tak, jak bylo uvedeno v legendě k tomuto vzorku.
Vzorek č. 2 obsahoval Arcanobacterium haemolyticum. Tento mikrob byl zaslán v EHK-215 jako edukativní vzorek. Plný počet bodů získalo 106 laboratoří, jedna laboratoř určila správně rod, dvě laboratoře mikroba neizolovaly nebo neidentifikovaly. Rod Arcanobacterium obsahuje 4 species, z nichž tři, A. haemolyticum, A. pyogenes a A. bernardiae, jsou klinicky významné. Tyto druhy jsou kataláza negativní a mají fermentativní metabolismus glukózy. Pro mezidruhovou identifikaci A. haemolyticum je rozhodující pozitivní inverzní CAMP test se Staphylococcus aureus. Tento mikrob je rovněž spolehlivě identifikován API Coryne. Numerický profil v testu API Coryne kmene A. haemolyticum z této série EHK byl 2530360, A. haemolyticum 99,9%ID.
Požadavek byl
označit signifikantního patogena a vyšetřit jeho citlivost ke gentamicinu a
ciprofloxacinu. Kmen č. 4 Proteus
mirabilis byl do NRL/ATB zaslán
jednou laboratoří v průběhu surveillance rezistence komunitních močových
patogenů v dubnu 2000. Kmen byl rezistentní k ciprofloxacinu a
citlivý ke gentamicinu. Všech 109
laboratoří, které se zúčastnily této série EHK, správně identifikovalo P.
mirabilis. Nesprávně označily tento kmen jako rezistentní ke gentamicinu
dvě laboratoře (1,8%) a jako citlivý k ciprofloxacinu 12 laboratoří
(11.0%). Celkové výsledky vyšetření citlivosti jsou v tabulce 1, která
obsahuje také limitní hodnoty průměrů inhibičních zón (IZ) a minimálních inhibičních
koncentrací (MIC) pro citlivé kmeny gramnegativních střevních tyček, výsledky
naměřené v NRL pro antibiotika a výsledky laboratoří v kategorii
citlivosti a rezistence u kmene č. 4.
Tabulka 1. Výsledky
vyšetření citlivosti kmene č. 4 Proteus
mirabilis
|
|
Průměry IZ (mm) |
MIC (mg/l) |
Správné výsledky |
||||
|
Antibiotikum |
limit pro citlivé [1] |
rozmezí naměřené v NRL* |
limit pro citlivé [1] |
hodnoty naměřené v NRL** |
kategorie [1] |
počet laboratoří |
% |
|
ciprofloxacin |
>=21 |
19-20 |
<=1 |
2-4 |
R |
97/109 |
89.0 |
|
gentamicin |
>=15 |
22-23 |
<=4 |
0.25 |
C |
107/109 |
98.2 |
* 5 měření diskovou difuzní metodou [1]; obsah disků:
gentamicin 10 ug, ciprofloxacin 5 ug.
** 2 měření diluční mikrometodou [1].
C - citlivý, R - rezistentní.
Kmen č. 5 Haemophilus influenzae
Kmen č. 5 je H.
influenzae CNCTC 5063 (kopie kmene ATCC 49247) pro kontrolu kvality
vyšetření citlivosti [1,2]. Požadavek byl na vyšetření citlivosti
k ampicilinu, tetracyklinu a ko-trimoxazolu. Kmen neprodukuje
beta-laktamázu, je však rezistentní k ampicilinu, tetracyklinu a citlivý
ke ko-trimoxazolu. Citlivost vyšetřilo 108 ze 109 laboratoří (99.1%) Celkové
výsledky vyšetření citlivosti jsou v tabulce 2, která obsahuje také
limitní hodnoty průměrů inhibičních zón (IZ) a minimálních inhibičních
koncentrací (MIC) pro citlivé kmeny H. influenzae, výsledky naměřené
v NRL pro antibiotika a výsledky laboratoří v kategorii citlivosti a
rezistence u kmene č. 5.
Tabulka 2. Výsledky
vyšetření citlivosti kmene č. 5 H. influenzae.
|
|
Průměry IZ (mm) |
MIC (mg/l) |
Správné výsledky |
||||
|
Antibiotikum |
limit pro citlivé kmeny H.i.
[1] |
rozmezí naměřené v NRL* |
limit pro citlivé kmeny H. i. [1] |
hodnoty naměřené v NRL** |
kategorie [1] |
počet laboratoří |
% |
|
ampicilin |
>=22 |
18-21 |
<=1 |
4 |
R |
98/108 |
9.3 |
|
tetracyklin |
>=29 |
18-20 |
<=2 |
>16 |
R |
105/108 |
97.2 |
|
ko-trimoxazol |
>=16 |
26-30 |
<=8 |
<=0.5 |
C |
106/108 |
98.1 |
* 5 měření diskovou difuzní metodou [1]; obsah disků: ampicilin 10 ug,
tetracyklin 30 ug, ko-trimoxazol 25 ug.
** 1 měření agarovou diluční metodou [1].
C - citlivý, R - rezistentní.
Závěr
MIC a
průměr inhibiční zóny ciprofloxacinu u kmene č. 4 P. mirabilis ukazují
na rezistenci nižšího stupně k fluorovaným chinolonům (tabulka 1). Kmen vytvářel kolem ciprofloxacinu inhibiční
zóny jen o 1-2 mm menší než je hraniční průměr pro citlivé kmeny, a to bylo
zřejmě příčinou proč 12 laboratoří (11%) nerozpoznalo jeho rezistenci. Určité
podezření na rezistenci kmene gramnegativní tyčky k fluorovaným chinolonům
může být jeho rezistence ke starým chinolonům (MIC kyseliny nalidixové u kmene
č. 4 byla MIC>64 mg/l), to však neplatí bezvýhradně. Identifikaci podobných
kmenů usnadňuje podrobná znalost distribuce průměrů IZ (nebo MIC) obvyklé
populace daného druhu, se kterou se mikrobiolog denně setkává. V NRL/ATB
byl uvnitř inhibiční zóny kolem disku s ciprofloxacinem zaznamenán růst
kolonií ve tvaru loukotí kola (http://www.szu.cz/cem/ehk/ehk280/ehk280.htm).
Toto zajímavé pozorování potvrdily i některé další laboratoře, které se
účastnity EHK-280.
Kmen pro
kontrolu kvality H. influenzae CNCTC 5063 (č. 5) byl zařazen do EHK
opakovaně, naposledy v EHK-182 v roce 1999 [3]. Srovnání výsledků tohoto
kmene ukazuje téměř identický počet laboratoří se správnými výsledky
v EHK-182 a EHK-280 u vyšetření citlivosti k tetracyklinu (97.1%,
respektive 97.2%) a ke ko-trimoxazolu (99%, respektive 98.1%). Výrazné zlepšení
bylo zaznamenáno u výsledků vyšetření citlivosti k ampicilinu. Přesto, že
v EHK-280 nerozpoznalo tuto 9.3% laboratoří, je to podstatně méně než
téměř 30% laboratoří, které tuto neenzymatickou rezistenci nerozpoznaly
v roce 1999.
Literatura
[1] Urbášková P. Rezistence
bakterií k antibiotikům. Vybrané metody. Trios 1998.
[2] National Committee for Clinical Laboratory Standards. Performance
standards for antimicrobial susceptibility testing; ninth informational supplement.
NCCLS document M100-S9. National Committee for Clinical Laboratory Standards,
Pa;1999.
[3] EHK – 182. Bakteriologická diagnostika – vyhodnocení. Zprávy CEM
1999;8(11):434-437.
.