Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2001; 11(3):139-140.

 

EHK-274  Sérologie hepatitidy B (markery)

 

 

Pavel Fritz

 

 

Datum odeslání: 15.10.2001

Počet účastníků: 75

Počet vzorků: 5 (A až E) o obsahu cca 1.75 ml lidské plazmy

Testované markery: HBsAg, anti-HBc total, anti-HBc IgM, HBeAg, anti-HBe, anti-HBs

Systém hodnocení: Laboratoře získávají jedno nezávislé hodnocení za marker HBsAg a druhé společné za zbylých 5 markerů. V prvním případě znamená každá chyba hodnocení „neúspěšná“. Ve druhém případě záleží na tom, zda laboratoř vyšetřuje 1-3 markery z této skupiny (každá chyba znamená hodnocení „neúspěšná“), nebo 4-5 (u jednoho markeru lze chybovat).

 

 

Tabulka 1: Správné výsledky

 

MARKER

                  VZOREK

A

B

C

D

E

HBsAg

  +

  +

  -

  +

  +

Anti-HBc total

  +

  +

  -

 

  +

Anti-HBc IgM

  -

  -

  -

 

 

HBeAg

  -

  -

  -

 

  -

Anti-HBe

  +

  +

  -

 

  +

Anti-HBs

  -

  -

  -

 

  -

vytmavená pole = “nehodnoceno”

 

 

Tabulka 2: Výsledky laboratoří podle jednotlivých markerů

 

Počet

chyb

                      Počet laboratoří (% vyšetřujících laboratoří)

HBsAg

anti-HBc total

anti-HBc IgM

HBeAg

anti-HBe

anti-HBs

0

      70

  (95.9%)

      62

  (98.4%)

      56

  (100.0%)

      60

  (98.4%)

      57

  (93.4%)

      67

  (97.1%)

1

       3*

    (4.1%)

        1

   (1.6%)

       

   

        1

   (1.6%) 

        4

    (6.6%) 

 

3

 

 

 

 

 

 

        1

    (1.4%)

4

 

      

  

 

       

   

   

        1

    (1.4%)

Netestuje   

        2

      12

      19

      14

      14

        6

Celkem

      75

      75

      75

      75

      75

      75

 


 

Tabulka 3: Počty chyb

 

Počet

chyb

Počet

laboratoří

     0

     1

     2

     3

     4

      65

        7

        1

        1

        1

Celkem

      75

 

 

 

Tabulka 4:

Kombinace vyšetřovaných markerů

 

Vyšetřované markery

Počet

laboratoří

Všech 6 markerů

Pouze HBsAg

Jiné kombinace

      49

        6

      20

 

 

Celkem

      75

 

 


           

Do EHK-274 bylo zařazeno 5 vzorků (A-E) lidských plazem. Vzorek D obsahoval HBsAg v nižší koncentraci, než bývá u pozitivních vzorků zařazovaných do EHK běžné, což žádoucím způsobem prověřilo úroveň vyšetřování tohoto klíčového markeru. Je potěšitelné, že laboratoře (až na jednu výjimku – viz dále) neměly s nižší koncentrací žádné problémy. Co se týče některých typů protilátek (zejména anti-HBe, ale i celkových anti-HBc), jejich hladina se ukázala být u vzorku D příliš blízká hraniční hodnotě pro objektivní posouzení výsledků. Proto se NRL-VH rozhodla omezit hodnocení u vzorku D pouze na marker HBsAg.

            Další výjimku učinila NRL-VH u vzorku E, kde marker anti-HBc IgM vyšel zhruba polovině laboratoří pozitivní nebo hraniční a polovině negativní. Rovněž v tomto případě bylo rozhodnuto jmenovaný marker nehodnotit (viz dále).

 

HBsAg

            U markeru HBsAg chybovaly celkem 3 laboratoře, z nichž 2 vykázaly falešnou pozitivitu u negativního vzorku C. Jedna z těchto dvou laboratoří si svůj pozitivní výsledek (který se téměř rovnal hraniční hodnotě) opravila konfirmačním testem a byla proto hodnocena jako „úspěšná“.

Poslední z laboratoří vykázala falešnou negativitu u pozitivního vzorku D. Oproti více běžným falešným pozitivitám jde o podstatně závažnější chybu. Přestože koncentrace HBsAg ve vzorku D byla poměrně nízká, stále ještě se jednalo o pozitivitu, kterou laboratoř musí být schopná zachytit. Situace je tím více alarmující, že uvedené pracoviště nevykázalo tento typ chyby poprvé. Proto laboratoři nebyl udělen certifikát pro rok 2002.

 

anti-HBc total

              U markeru anti-HBc total chybovala pouze 1 laboratoř. Jednalo se o falešně pozitivní výsledek u negativního vzorku C.

 

anti-HBc IgM

                        U markeru anti-HBc IgM nebyla za chybující označena žádná laboratoř, přestože přibližně polovina účastníků EHK vyšetřujících tento typ protilátek vykázala pozitivitu nebo hraniční hodnotu u vzorku E, zatímco ostatní ohlásili výsledek negativní. Jednalo se o vzorek infikovaného člověka s pozitivním nálezem markerů HBsAg, anti-HBc total a anti-HBe. Přítomnost nízké hladiny anti-HBc IgM proto nelze vyloučit, stejně jako falešně pozitivní výsledky dané vlastnostmi vzorku. Rozložení pozitivních a negativních hodnot nebylo nahodilé, ale do značné míry kopírovalo typy použitých testů. Výhradně negativní výsledky získali uživatelé destičkových testů firem Pasteur a Murex (oba testy  byly použity rovněž v NRL-VH před odesláním vzorků), stejně jako uživatelé automatu IMx firmy Abbott. Pouze pozitivní nebo hraniční hodnoty oproti tomu získali uživatelé destičkové soupravy firmy Sorin a stejný typ výsledků převažoval rovněž u automatů AxSYM firmy Abbott, které použilo přes 40% účastníků EHK provádějících toto vyšetření (z nich 70% ohlásilo výsledek pozitivní nebo hraniční). Na základě výše uvedeného se NRL-VH rozhodla marker anti-HBc IgM u vzorku E nehodnotit.

 

HBeAg

            U markeru HBeAg chybovala pouze jediná laboratoř, která vykázala falešnou pozitivitu u vzorku E, přičemž její číselné hodnoty byly správné (S/CO < 1) a neodpovídaly uvedenému slovnímu hodnocení “pozitivní” (důsledek přehlédnutí?).

 

anti-HBe

            U markeru anti-HBe chybovaly 4 laboratoře. 3x se jednalo o falešnou pozitivitu u vzorku C, 1x o falešnou negativitu u vzorku E.

 

anti-HBs

                U markeru anti-HBs chybovaly 2 laboratoře. Jedna z nich označila 3 ze 4 hodnocených negativních vzorků za pozitivní s koncentrací anti-HBs v rozmezí přibližně 11-13 mIU/ml, což je těsně nad hranicí pozitivity (10 mIU/ml). Druhá laboratoř vykázala falešně pozitivní výsledky u všech 4 hodnocených vzorků, přičemž své výsledky nekvantifikovala.

 

 

                                                                                                        Mgr. Pavel Fritz

                                                                                                        NRL pro virové hepatitidy

                                                                                                        SZÚ-CEM