Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2003; 12(1): 30

 

Lidský metapneumovirus – nově identifikovaný původce akutních respiračních viróz

 

Martina Havlíčková

 

Souhrn

Nově identifikovaným původcem akutních respiračních onemocnění je lidský metapneumo-virus. Virus byl izolován v Holandsku v roce 2001 od dětských pacientů s akutními příznaky virové respirační infekce, u nichž nebylo prokázáno žádné ze známých virových agens. Klinicky se onemocnění podobala RS virózám. Na základě svých vlastností byl virus přiřazen do čeledi Paramyxoviridae rod  Metapneumovirus. Jeho cirkulace byla, kromě Holandska,  dále prokázána v Severní Americe, Austrálii a Velké Británii. Velmi pravděpodobně se tedy jedná a univerzálně rozšířené agens, jehož výskyt je nutné předpokládat i u nás.

 

        Akutní respirační onemocnění virového původu (ARO) tvoří z hlediska původců značně nesourodou skupinu. Vyvolavatelé se liší typem nukleové kyseliny, organizací nukleokapsidy a dále též celou řadou fyzikálních i chemických vlastností - nicméně jako kauzálním agens způsobují téměř identické spektrum symptomů a syndromů. Přes značný pokrok v diagnostice virových původců ARO zůstává nemalý počet případů etiologicky neobjasněn. Průkaz  nového viru jako vyvolavatele akutních respiračních viróz pak pouze dokládá mnohotvárnost této problematiky, jejíž neprobádané vody jsou nepochybně pořád rozsáhlé.

 

       Původní studie v Holandsku, jež existenci nového respiračního viru prokázala [1], vyšla ze souboru 28 nasofaryngeálních výtěrů pacientů s příznaky ARO, mezi nimiž nebyla žádná epidemiologická souvislost a u nichž se nepodařilo objasnit původce. Klinické vzorky byly shromážděny během posledních 20 let, a to výlučně v zimních měsících. 27 dětí z celkového počtu 28 bylo mladších 5 let, 13 dětí bylo ve věku 0-12 měsíců, 12  dětí  přináleželo do věkové skupiny 1-5 let. Symptomy byly podobné jako u RSV infekce, a to kašel (často s vysokou horečkou), bronchiolitida, pneumonie; onemocnění provázela myalgie a občas i zvracení.   Několik pacientů bylo hospitalizováno s příznaky respiračního selhání. Virus byl izolován na terciární linii buněk opičích ledvin (tMK), velmi pomalý růst vykazoval ve VERO buňkách. V MDCK buňkách se, podobně jako v kuřecích fibrolastech, nereplikoval. Cytopatický efekt se v porovnání s RSV (respirační synsyciální virus)  vyvíjel pomaleji, morfologicky však byl podobný.  V elektronovém mikroskopu  se částice jevily jako pleomorfní, v průměru 150-600 nm velké, s krátkými obalovými projekcemi v délce asi 13-17 nm a celkově podobné paramyxovirům. Po standardní preparaci chloroformem došlo při množení na tMK buňkách k více jak 10 000 násobnému poklesu TCID50. Naopak pro úspěšné pomnožení byla nezbytná spoluúčast trypsinu. Buněčný supernatant z infikovaných tkáňových kultur nejevil aglutinační aktivitu ani s jedním druhem testované suspenze červených krvinek (morčecí, krůtí, kuřecí). Tyto nálezy podporovaly domněnku, že nový virus může být součástí čeledi paramyxovirů. Z patnácti izolovaných kmenů byla extrahována nukleová kyselina a testována pomocí RT-PCR s primery známých paramyxovirů: parainfluenza 1- 4, virus příušnic, spalniček, RSV, simian virus 5 (SV5), Sendai virus a Newcastle disease virus. Testované vzorky nevykazovaly s žádným použitým primerem relevantní reakci. Dvěma izoláty byly dále naočkovány fretky i morčata, a to živým neupravovaným virem intranasálně. S těmito séry pak bylo metodou nepřímé IF virusneutralizace testováno  všech 28 izolovaných kmenů, jež prokázaly značnou sérologickou příbuznost až identitu.Vzhledem k homologii určené sekvenční analýzou byl virus provizorně přiřazen do rodu Metapneumovirus  z čeledi Paramyxoviridae.

 

        Virus byl prokázán v Austrálii [2], Velké Británii [3] i v USA [4] a lze tedy počítat s jeho universálním rozšířením. To znamená, že se velmi pravděpodobně podílí na etiologii ARO i u nás.

 

        V souvislosti s objevem tohoto nového viru vyvstává opět důležitost archivace sér pacientů s jasnými příznaky virové respirační infekce, avšak bez  objasněné etiologie. Navíc, zpětné zmapování tzv. promořenosti bylo  možné právě rozborem vhodného souboru sér, jež byly archivovány desítky let [1]. Nově objevený lidský metapneumovirus nemusí být totiž zdaleka poslední.

 

LITERATURA

 

[1] van den Hoogen BG, de Jong J, Groen J, Kuiken T, de Groot R, Fouchier R, Osterhaus ADME : A newly discovered human pneumovirus isolated from young children with respiratory disease. Nature Medicine, 2001; 7 (6): 719-724.  

 

[2] Nissen MD, Mackay IM,Withers SJ, Siebert DJ, Sloots TP. Evidence of human metapneumovirus in Australian children. The Medical Journal of Australia 2002; 176 (4): 188.  

 

[3] Stockton J, Stephenson I, Fleming D, Zambon M: Human metapneumovirus as a cause of community acquired respiratory illness. Emerging Infectius Diseases http://www.cdc.gov/ncidod/eid/vol8no9/02-0084.htm

 

[4] Peret TCT, Boivin G, Li Y, Couillard Ch, Humphrey Ch, Oesterhaus ADME, Erdman D, Anderson LJ : Characterization of human metapneumovirus isolated from patients in North America. The Journal of Infectious Diseases 2002; 185: 1660-1663.

   

 

Martina Havlíčková

Národní referenční laboratoř pro chřipku

SZÚ