Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2003; 12(1): 28 – 29.

 

Vyšetření  citlivosti k penicilinu u druhu Streptococcus agalactiae

 

Pavla Urbášková, Jitka Motlová

 

Souhrn

Výsledky 238 kmenů Streptococcus agalactiae, u nichž byla vyšetřena citlivost současně referenční agarovou metodou a diskovou difuzní metodou, potvrdily dosavadní dobrou citlivost tohoto druhu k penicilinu. Nové kritérium pro interpretaci výsledků vyšetření citlivosti b-hemolytických streptokoků k penicilinu diskovou difuzní metodou, které  zavedla NCCLS v roce 2001 (vytvoření inhibiční  zóny >=24 mm namísto inhibiční zóny  >=28 mm užívané dříve), respektuje přirozenou distribuci populace S. agalactiae podle citlivosti k penicilinu a eliminuje nejednoznačné výsledky.

 

Podání účinných antibiotik během porodu rodičkám kolonizovaným Streptococcus agalactiae prokazatelně snižuje kolonizaci plodu a následný výskyt časných novorozeneckých invazivních infekcí způsobených tímto druhem. Center for Diseases Control and Prevention (CDC) vydalo v roce 1997 návod k antibiotické profylaxi těchto infekcí [1], který byl v roce 2002 revidován [2]. Jako profylaxi volby doporučuje CDC nitrožilní podání penicilinu G nebo ampicilinu, alternativou pro ženy přecitlivělé k  penicilinovým antibiotikům je erytromycin nebo klindamycin.  V České republice jednotné doporučení postupu pro profylaxi doposud chybí a k dispozici nejsou ani recentní údaje o citlivosti  k antibiotikům volby a antibiotikům alternativním pro léčbu a profylaxi infekcí způsobených S. agalactiae.

K vyšetření citlivosti streptokoků včetně druhu S. agalactiae lze podle doporučení  mezinárodně akceptované komise National Committee for Clinical Laboratory Standards  (NCCLS) použít kvantitativní metodu vyšetření minimální inhibiční koncentrace (MIC) antibiotik v bujónu nebo v agaru, nebo diskovou difuzní metodu [3,4,5].  NCCLS, která  vydává a reviduje podrobné metody vyšetření citlivosti bakterií k antibiotikům každým rokem, změnila v roce 2001 [4] proti předcházejícímu období  [3] kritéria pro interpretaci diskové difuzní metody vyšetření citlivosti b-hemolytických streptokoků k penicilinu, interpretační kritéria pro kvantitativní metody zůstala zachována.  Za citlivé se pokládají kmeny b-hemolytických streptokoků, inhibované koncentrací <= 0,125 mg/l penicilinu při vyšetření kvantitativní metodou v bujonu nebo v agaru a izoláty které vytvářejí inhibiční zónu >= 24 mm kolem disku s 10 ug  penicilinu při vyšetření citlivosti diskovou difuzní metodou [4,5].  Před rokem 2001 byly pokládány za citlivé k penicilinu b-hemolytické streptokoky vytvářející inhibiční zónu kolem tohoto disku o průměru >=28 mm [3]. Současná kritéria NCCLS (5) pro citlivé kmeny b-hemolytických streptokoků k penicilinu a k dalším antibiotikům doporučovaným k léčbě a profylaxi novorozeneckých infekcí způsobených tímto druhem bakterií jsou v tabulce 1.

Podle NCCLS není nutno pro klinické účely rutinně vyšetřovat citlivost S. agalactiae k penicilinu (a tudíž k dalším b-laktamovým antibiotikům vhodným k léčbě infekcí způsobeným tímto druhem, na něž se účinnost penicilinu bezvýhradně vztahuje) stejně jako k vankomycinu, protože doposud nejsou potvrzeny rezistentní kmeny k těmto antibiotikům.  Kritéria pro kategorizaci citlivosti k penicilinu u b-hemolytických streptokoků mají sloužit pro účely farmaceutického vývoje, epidemiologii, nebo k monitorování vývoje rezistence. NCCLS doporučuje, aby každý kmen S. agalactiae necitlivý k penicilinu byl zaslán do referenční laboratoře k ověření. 

V roce 2001 byl hlášen výskyt kmenů S. agalactiae necitlivých nebo rezistentních k penicilinu z Asie [6], Kanady [7] a v roce 2002 také z USA [8]. V nedávné minulosti bylo zasláno také z našich mikrobiologických laboratoří několik kmenů s podezřením na rezistenci k penicilinu k ověření do Centra epidemiologie a mikrobiologie SZÚ. Tyto izoláty byly zařazeny do souboru  kmenů, identifikovaných v NRL pro streptokoky a enterokoky SZÚ jako S. agalactiae, a jejich citlivost k antibiotikům byla vyšetřena v NRL pro antibiotika SZÚ.

V této zprávě jsou předloženy výsledky vyšetření citlivosti k penicilinu u 238 kmenů S. agalactiae, které byly současně vyšetřeny referenční kvantitativní  agarovou diluční  metodou a diskovou difuzní metodou podle postupu doporučeného NCCLS [5].  Rozložení minimálních inhibičních koncentrací penicilinu u souboru těchto kmenů  je na obrázku 1, rozložení  průměrů inhibičních zón je na obrázku 2. Vztah mezi průměrem inhibiční zóny a minimální inhibiční koncentrací penicilinu je v tabulce 2.

Výsledky MIC penicilinu vyšetřené agarovou diluční metodou ukazují, že penicilin inhibuje kmeny S. agalactiae v úzkém rozmezí koncentrací 0,016-0,125 mg/l (graf 1).  Tato distribuce MIC je téměř identická s distribucí MIC penicilinu u 469 invazivních a neinvazivních izolátů  S. agalactiae vyšetřených diluční mikrometodou [9]. Všechny kmeny s výjimkou dvou splňovaly  také kritéria pro citlivost při vyšetření diskovou difuzní metodou (graf 2). Oba kmeny, které vytvářely inhibiční zónu o průměru 23 mm, tudíž o 1 mm menší než limitní zóna pro citlivé kmeny 24 mm,  patřily podle výsledků vyšetření MIC penicilinu  (0,063 mg/l, respektive 0,125 mg/l) ke kmenům citlivým (tabulka 2). Naše výsledky potvrdily, že kritéria NCCLS pro vyšetření citlivosti b-hemolytických streptokoků k penicilinu [5] lze akceptovat. Podrobná analýza vztahů MIC a průměru inhibičních zón u penicilinu a dalších antibiotik u tohoto souboru kmenů se v současné době zpracovává.

 

Literatura

1.       Centers for Diseases Control and Prevention. Prevention of perinatal group B streptococcal diseases: a public health perspective. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 1996; 45(RR-7): 1-42.

2.       Centers for Diseases Control and Prevention. Prevention of perinatal group B streptococcal disease. Revized guidelines from CDC.  MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2002; 51(RR-7): 1-22.

3.       NCCLS. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing.; tenth informational supplement. NCCLS document M100-S10, Pa, USA 2000.

4.       NCCLS. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing.; eleven informational supplement. NCCLS document M100-S11, Pa, USA 2001.

5.       NCCLS. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing.; twelfth informational supplement. NCCLS document M100-S12, Pa, USA 2002.

6.       Hsueh PR, Teng LJ, Lee LN, Ho SW, Yang PC, Luh KT. High incidence of erythromycin resistance among clinical isolates of Streptococcus agalactiae in Taiwan. Antimicrob Agents Chemother 2001; 45: 3205-3208.

7.       De Azavedo JCS, McGavin M, Duncan C, Low DE, McGeer A. Prevalence and mechanisms of resistance in invasive and noninvasive group B streptococcus isolates from Ontario, Canada. Antimicrob Agents Chemother 2001; 45: 3504-3508.

8.       Gordon KA, Beach ML, Biedenbach DJ et al. Antimicrobial susceptibility patterns of b-hemolytic and viridans group streptococci: report from the SENTRY Antimicrobial Surveillance Program (1997-2000). Diagn Microbiol Infect Dis 2002; 43: 157-162.

9.       Urbášková P, Motlová J, Straková L,  Sak  P, Sever T, Balejová M, Bártová M. Antibiotická rezistence u kmenů Streptococcus  agalactiae izolovaných od gravidních žen a novorozenců v letech 2001-2002. (Praktický lékař 2003, v tisku). 

 

Podpořeno grantem Ministerstva zdravotnictví České republiky IGA NI/5906-3


Tabulka 1.  Hraniční hodnota minimální inhibiční koncentrace (MIC) antibiotik a odpovídající průměr inhibiční zóny  (IZ) pro interpretaci citlivých  b-hemolytických streptokoků  (NCCLS 2002) [5].

 

Antibiotikum

MIC

Průměr IZ*

penicilin

<= 0,125 mg/l

>= 24 mm

ampicilin

<= 0,25 mg/l

>= 24 mm

erytromycin

<= 0,25 mg/l

>= 21 mm

klindamycin

<= 0,25 mg/l

>= 19 mm

 

* obsah disků: penicilin 10 J, ampicilin 10 ug, erytromycin 15 ug, klindamycin 2 ug

 

 

 

Graf 1. Distribuce 238 kmenů S. agalactiae podle minimálních inhibičních koncentrací (MIC) penicilinu vyšetřených agarovou diluční metodou

 

 

 

Graf 2. Distribuce 238 kmenů S. agalactiae podle průměrů inhibičních zón vytvořených kolem disků s 10 J penicilinu. 

 

 


 

 

 

Tabulka 2. Průměry inhibičních zón (IZ) kolem disků s 10 J penicilinu versus MIC penicilinu u 238 kmenů S. agalactiae.

Dva zvýrazněné kmeny, které vytvářejí  IZ = 23 mm, jsou inhibovány koncentrací 0,063, respektive 0,125 mg/l penicilinu.

 

 

 

MIC penicilinu

Průměr IZ

0,125 mg/l

0,063 mg/l

0,032 mg/l

0,016 mg/l

23 mm

1

1

 

 

24 mm

 

3

5

 

25 mm

 

9

2

 

26 mm

 

15

10

 

27 mm

 

28

11

 

28 mm

 

31

11

 

29 mm

 

29

7

 

30 mm

 

25

7

 

31 mm

 

18

6

1

32 mm

 

7

2

1

33 mm

 

3

2

 

34 mm

 

3

 

 

 

 

Pavla Urbášková, Jitka  Motlová

CEM SZÚ, Praha