Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2003; 12(1): 30
Lidský
metapneumovirus – nově identifikovaný původce akutních respiračních viróz
![]()
Martina Havlíčková
Souhrn
Nově identifikovaným původcem akutních respiračních
onemocnění je lidský metapneumo-virus. Virus byl izolován v Holandsku v roce
2001 od dětských pacientů s akutními příznaky virové respirační infekce, u
nichž nebylo prokázáno žádné ze známých virových agens. Klinicky se onemocnění
podobala RS virózám. Na základě svých vlastností byl virus přiřazen do čeledi Paramyxoviridae
rod Metapneumovirus. Jeho
cirkulace byla, kromě Holandska, dále
prokázána v Severní Americe, Austrálii a Velké Británii. Velmi pravděpodobně se
tedy jedná a univerzálně rozšířené agens, jehož výskyt je nutné předpokládat i
u nás.
Akutní respirační onemocnění virového
původu (ARO) tvoří z hlediska původců značně nesourodou skupinu.
Vyvolavatelé se liší typem nukleové kyseliny, organizací nukleokapsidy a dále
též celou řadou fyzikálních i chemických vlastností - nicméně jako kauzálním
agens způsobují téměř identické spektrum symptomů a syndromů. Přes značný
pokrok v diagnostice virových původců ARO zůstává nemalý počet případů
etiologicky neobjasněn. Průkaz nového
viru jako vyvolavatele akutních respiračních viróz pak pouze dokládá
mnohotvárnost této problematiky, jejíž neprobádané vody jsou nepochybně pořád
rozsáhlé.
Původní studie v Holandsku, jež
existenci nového respiračního viru prokázala [1], vyšla ze souboru 28
nasofaryngeálních výtěrů pacientů s příznaky ARO, mezi nimiž nebyla žádná
epidemiologická souvislost a u nichž se nepodařilo objasnit původce. Klinické
vzorky byly shromážděny během posledních 20 let, a to výlučně v zimních
měsících. 27 dětí z celkového počtu 28 bylo mladších 5 let, 13 dětí bylo
ve věku 0-12 měsíců, 12 dětí přináleželo do věkové skupiny 1-5 let.
Symptomy byly podobné jako u RSV infekce, a to kašel (často s vysokou
horečkou), bronchiolitida, pneumonie; onemocnění provázela myalgie a občas i
zvracení. Několik pacientů bylo
hospitalizováno s příznaky respiračního selhání. Virus byl izolován na
terciární linii buněk opičích ledvin (tMK), velmi pomalý růst vykazoval ve VERO
buňkách. V MDCK buňkách se, podobně jako v kuřecích fibrolastech,
nereplikoval. Cytopatický efekt se v porovnání s RSV (respirační
synsyciální virus) vyvíjel pomaleji,
morfologicky však byl podobný.
V elektronovém mikroskopu
se částice jevily jako pleomorfní, v průměru 150-600 nm velké,
s krátkými obalovými projekcemi v délce asi 13-17 nm a celkově
podobné paramyxovirům. Po standardní preparaci chloroformem došlo při množení
na tMK buňkách k více jak 10 000 násobnému poklesu TCID50.
Naopak pro úspěšné pomnožení byla nezbytná spoluúčast trypsinu. Buněčný
supernatant z infikovaných tkáňových kultur nejevil aglutinační aktivitu
ani s jedním druhem testované suspenze červených krvinek (morčecí, krůtí,
kuřecí). Tyto nálezy podporovaly domněnku, že nový virus může být součástí
čeledi paramyxovirů. Z patnácti izolovaných kmenů byla extrahována nukleová
kyselina a testována pomocí RT-PCR s primery známých paramyxovirů:
parainfluenza 1- 4, virus příušnic, spalniček, RSV, simian virus 5 (SV5),
Sendai virus a Newcastle disease virus. Testované vzorky nevykazovaly s žádným
použitým primerem relevantní reakci. Dvěma izoláty byly dále naočkovány fretky
i morčata, a to živým neupravovaným virem intranasálně. S těmito séry pak
bylo metodou nepřímé IF virusneutralizace testováno všech 28 izolovaných kmenů, jež prokázaly značnou sérologickou
příbuznost až identitu.Vzhledem k homologii určené sekvenční analýzou
byl virus provizorně přiřazen do rodu Metapneumovirus
z čeledi Paramyxoviridae.
Virus byl prokázán v Austrálii
[2], Velké Británii [3] i v USA [4] a lze tedy počítat s jeho
universálním rozšířením. To znamená, že se velmi pravděpodobně podílí na
etiologii ARO i u nás.
V souvislosti s objevem
tohoto nového viru vyvstává opět důležitost archivace sér pacientů
s jasnými příznaky virové respirační infekce, avšak bez objasněné etiologie. Navíc, zpětné zmapování
tzv. promořenosti bylo možné právě
rozborem vhodného souboru sér, jež byly archivovány desítky let [1]. Nově
objevený lidský metapneumovirus nemusí být totiž zdaleka poslední.
LITERATURA
[1] van den Hoogen BG, de Jong J, Groen J, Kuiken T, de
Groot R, Fouchier R, Osterhaus ADME : A newly discovered human pneumovirus
isolated from young children with respiratory disease. Nature Medicine,
2001; 7 (6): 719-724.
[2]
Nissen MD, Mackay IM,Withers SJ, Siebert DJ, Sloots TP. Evidence of human
metapneumovirus in Australian children. The Medical Journal of Australia 2002;
176 (4): 188.
[3]
Stockton J, Stephenson I, Fleming D, Zambon M: Human metapneumovirus as a cause
of community acquired respiratory illness. Emerging Infectius Diseases http://www.cdc.gov/ncidod/eid/vol8no9/02-0084.htm
[4]
Peret TCT, Boivin G, Li Y, Couillard Ch, Humphrey Ch, Oesterhaus ADME, Erdman
D, Anderson LJ : Characterization of human metapneumovirus isolated from
patients in North America. The Journal of Infectious Diseases 2002; 185:
1660-1663.
Martina Havlíčková
Národní referenční
laboratoř pro chřipku
SZÚ