Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2003; 12(10):426-429.

 

Sedmé setkání EMGM

(European Monitoring Group on Meningococci)

Pavla Křížová, Jitka Kalmusová, Martin Musílek

 

Souhrn

Sedmé konference EMGM se účastnilo kolem 150 evropských specialistů v problematice meningokokových onemocnění v oborech epidemiologie, mikrobiologie i kliniky. Den před konferencí EMGM probíhaly 2 pracovní schůze řešitelů projektů EU: Men-Net a EU-IBIS. Jednání EMGM bylo rozděleno do 8 sekcí a 1 paralelního sympozia: epidemiologie, kontrola kvality charakterizace fenotypu a genotypu N. meningitidis, kontrola kvality bezkultivační diagnostiky invazivního meningokokového onemocnění, kontrola kvality určování citlivosti N. meningitidis na antibiotika, sérologie a možnost kontroly kvality, vztahy mezi EMGM a WHO, vakcinační strategie, typizace a charakterizace kmenů, nosičské studie, strategie vývoje vakcíny proti meningokoku skupiny B. Desetiletá tradice EMGM přinesla celoevropské sjednocení laboratorních metod diagnostiky invazivního onemocnění a charakterizace meningokoků. Je rozvinut kontinuální systém kontroly kvality ve všech laboratorních metodách, který přináší jejich zkvalitnění a standardizaci. V projektech Men-Net a EU-IBIS, které se integrovaly do EMGM, vznikla řada celoevropských databází, které poskytují unikátní epidemiologické i mikrobiologické informace o meningokokovém onemocnění v Evropě. Všichni členové EMGM mají zájem v těchto úspěšných a užitečných aktivitách pokračovat. Pražská NRL pro meningokokové nákazy se účastní ve všech projektech kontroly kvality i v obou projektech EU. Šíře a kvalita záběru pražské NRL vzbuzuje příznivý ohlas.

 

Sedmé konference EMGM, která se konala ve dnech 23. – 28. září 2003 ve španělské Costa Teguize se účastnilo kolem 150 evropských specialistů v problematice meningokokových onemocnění v oborech epidemiologie, mikrobiologie i kliniky. Jednání bylo rozděleno do 8 sekcí a 1 paralelního symposia, na nichž odeznělo 39 přednášek a bylo prezentováno 33 posterů. Den před konferencí EMGM probíhaly 2 pracovní schůze řešitelů projektů EU: Men-Net a EU-IBIS. Na řešení obou projektů pražská NRL spolupracuje a účastnili jsme se obou pracovních jednání, kde byly prezentovány výsledky získané při řešení projektů.

 

Výsledky řešení projektu Men-Net (koordinace prof. M. Frosch, Würzburg)

Projekt je řešen od roku 2001. Byly prezentovány výsledky řešení jednotlivých okruhů projektu:

WP1: utvoření evropského meningokokového MLST centra

WP2: bezkultivační detekce a typizace meningokoků

WP3: vyvinutí DNA mikroarray ke srovnání celého genomu a charakterizaci izolátů

WP4: utvoření evropského meningokokového epidemiologického centra

WP5: studium nosičství meningokoků v Evropě

WP6: sledování rozšíření ATB rezistentních meningokoků v Evropě

WP7: studium hypervirulentních meningokoků

Bylo prezentováno a všemi konstatováno, že všechny pracovní okruhy jsou řešeny na vynikající odborné úrovni, jsou získávány a již publikovány prioritní výsledky a dochází k celoevropskému propojení meningokokových epidemiologických a mikrobiologických databází. Získané výsledky jsou publikovány na webové stránce projektu (http://neisseria.org/nm/emgm/eumennet/) a jsou ošetřeny přístupovými právy. Pražská NRL pro meningokokové nákazy je zapojena ve všech pracovních okruzích kromě WP3 a WP7, we spolupráci s NRL pro antibiotika řešíme i WP6.

 

Výsledky řešení projektu EU-IBIS (koordinace Dr. S. Handford, Londýn)

V projektu EU-IBIS jsou shromažďovány a analyzovány epidemiologické údaje o výskytu invazivních meningokokových a hemofilových onemocnění v evropských státech. Česká republika je do tohoto projektu zapojena již řadu let a poskytuje koordinátorům projektu data v šestiměsíčních intervalech. Koordinátorské pracoviště připravuje roční analýzy celoevropských dat. V současné době je zřizována webová stránka projektu (http://www.euibis.org/) a byla diskutována přístupová práva k jednotlivým výsledkům.

 

EMGM:

 

Paralelní symposium: Strategie vývoje vakcíny proti meningokoku skupiny B

Moderátoři: P. Křížová (ČR) a J. Vázquez (Španělsko)

Odeznělo šest přednášek předních výrobců vakcín proti meningokoku skupiny B. Přestože bylo dosaženo významých pokroků, zejména díky sekvenaci celého genomu N. meningitidis, univerzálně účinná vakcína proti všem meningokokům skupiny B je stále nedostupná.

 

Epidemiologie

Moderátoři: S. Hanford (UK) a A.J.Fox (UK)

Koordinátorka projektu EU-IBIS (S. Hanford, UK) prezentovala současnou epidemiologickou situaci invazivního meningokokového onemocnění v Evropě. V některých státech je vysoká incidence onemocnění způsobeného meningokokem sérologické skupiny C a tyto státy aplikují různé strategie vakcinace konjugovanou vakcínou proti meningokoku skupiny C. Česká republika patří mezi země s nízkou incidencí invazivního onemocnění působeného meningokokem C. V dalších přednáškách byly prezentovány konkrétní epidemiologické situace ve vybraných zemích. E. Kaczmarski uvedl současnou epidemiologickou situaci v Anglii, která jako první zahájila v roce 1999 plošnou vakcinační kampaň proti meningokoku séroskupiny C a zařadila tuto vakcínu do rutinního očkovacího schématu malých dětí. Byly předloženy doklady, že v Anglii nedošlo vlivem selekčního vakcinačního tlaku ke změně polysacharidového pouzdra z C na B. Naopak J. Vázquez předložil důkazy, že ve Španělsku došlo vlivem selekčního vakcinačního tlaku k mutaci a je zjišťován meningokok B:2a:P1.5, který vykazuje vyšší virulenci a působí ohniskový výskyt onemocnění podobně jako C varianta. Snadno dostupným testem pro zjištění virulentní varianty meningokoka B:2a:P1.5 je určení rezistence na sulfonamidy. Změnu polysacharidového pouzdra vlivem vakcinace prezentovala rovněž Itálie.

 

Kontrola kvality (QA): charakterizace fenotypu a genotypu N. meningitidis

Kontrola kvality (QA): bezkultivační diagnostika invazivního onemocnění

Moderátoři: M. K. Taha (Francie) a A. J. Fox (UK)

Kontroly kvality se účastnilo 11 evropských laboratoří, včetně pražské NRL pro meningokokové nákazy. Cílem bylo určení etiologického agens (N. meningitidis, H. influenzae, S. pneumoniae) metodou PCR v 20 klinických vzorcích a tato agens dle možností dále fenotypově či genotypově charakterizovat. Pražská NRL patřila mezi 7 evropských laboratoří, které určují celé spektrum uvedených agens a mezi pouze 2 evropské laboratoře, které určují genotyp meningokoka metodou MLST, aniž je k dispozici izolát. Celkově se pražská NRL zařadila v této kontrole kvality na druhé nejlepší místo. Výsledky kontroly kvality bezkultivační diagnozy meningokokového onemocnění jsou v současnosti připravovány k publikaci.

 

Kontrola kvality (QA): určování citlivosti N. meningitidis na antibiotika

Moderátoři: C. Block (Izrael) a J. Vázquez (Španělsko)

Kontroly kvality určování citlivosti na antibiotika se účastnilo 15 laboratoří, včetně pražské NRL pro meningokokové nákazy a NRL pro antibiotika. Citlivost byla určována difusní agarovou metodou a E-testem. Bylo zjištěno sjednocení metod oproti předchozí kontrole kvality. Hraniční hodnoty MIC pro odlišení rezistentních a citlivých kmenů vůči jednotlivým antibiotikům však v Evropě zůstávají nesjednoceny. Bude učiněn pokus dosáhnout sjednocení i v této oblasti. Výsledky již byly předloženy k publikaci.

 

Sérologie a možnost kontroly kvality (QA)

Moderátoři: G. Van den Dobbelsteen (Holandsko) a R. Borrow (UK)

Dotazníkovou metodou, které se účastnila i pražská NRL pro meningokokové nákazy, byly srovnány sérologické metodiky užívané v evropských meningokokových laboratořích a byla zjištěna nejednotnost v používaných metodách. Je připravována kontrola kvality sérologických metod – pražská NRL se do této kontroly kvality přihlásila.

 

Vztahy EMGM a WHO

Moderátoři: P. Olcen (Švédsko) a E. Bertherat (Švýcarsko)

Byla prezentována epidemiologická situace v Saudské Arábii a v Africe. Incidence invazivního meningokokového onemocnění je zde velmi vysoká a řeší se vakcinačními kampaněmi. V Saudské Arábii je situace komplikovaná mutací séroskupiny C v séroskupinu W135 (W135:2a:P1.2,5, ST-11). WHO nemá dostatek prostředků k zajištění vakcín na očkovací akce a proto vyzývá výrobce vakcín k poskytnutí levných vakcín k řešení těchto situací a rovněž vyzvala EMGM k pomoci.

 

Vakcinační strategie

Moderátoři: M. Ramsay (UK) a R. Cano (Španělsko)

Byl podán přehled vakcinačních strategií v Evropě. Země s vysokou incidencí invazivního onemocnění způsobeného meningokokem C zahájily či zahajují vakcinační kampaně konjugovanou vakcínou proti meningokoku C. V řadě zemí s nižší incidencí, tj. podobnou jako je v České republice, je vakcinace populace podporována zdravotnickými organizacemi a pojišťovnami. V zemích se zahájenou vakcinací je sledován jednak eventuální selekční tlak vakcinace a vznik kapsulárních mutant meningokoků, jednak účinnost vakcinace a eventuální selhání vakcíny. Rovněž bylo sledováno očkování pracovníků ve zvýšeném riziku vzniku invazivního meningokokového onemocnění. V Anglii je k ochraně laboratorních pracovníků používána následující strategie: první vakcinace polysacharidovou vakcínou (A+C, nebo A+C+Y+W135) a po třech letech revakcinace konjugovanou Men C vakcínou. Kliničtí pracovníci nejsou očkováni v žádné z evropských zemí. Účastnící EMGM se s touto strategií ztotožnili a budou ji prosazovat k realizaci ve svých zemích.

 

Typizace a charakterizace kmenů N. meningitidis

Moderátoři: I. Feavers (UK) a S. Gray (UK)

Výrobce monoklonálních protilátek (NIBSC, UK) podal přehled dostupných reagencií. Bylo konstatováno, že monoklonální protilátky nepokrývají celé spektrum nekapsulárních antigenů a značné procento meningokoků zůstává netypovatelné. Řešení této situace přináší sekvenace porinů, která zajišťuje stoprocentní typovatelnost kmenů. Univerzální možnosti klonálního studia meningokokových populací přináší multilokusová sekvenační typizace (MLST). V této sekci prezentoval M. Musílek změnu klonální distribuce u meningokoků způsobujících invazivní onemocnění v České republice, kdy v posledních letech byl zaznamenán vzestup hypervirulentních komplexů séroskupiny B.

 

Nosičské studie

Moderátoři: D. Caugant (Norsko) a G. Tzanakaki (Řecko)

Byly prezentovány výsledky srovnání metodou MLST meningokokových populací zjištěných u zdravých nosičů versus u pacientů ve třech zemích: Česká republika, Norsko a Řecko. Jsou srovnávány kmeny z konce 90. let a z let 2002/2003. Byly zjištěny klonální komplexy, které jsou převážně u nosičských kmenů versus hypervirulentní klonální komplexy, které působí invazivní onemocnění po celé Evropě. V této sekci prezentovala P. Křížová výsledky sledování dlouhodobosti a mnohočetnosti nosičství N. meningitidis metodou RAPD a MLST. Naše výsledky ukazují, že populace nosičských meningokoků jsou více heterogenní než populace působící invazivní onemocnění, že nosičství má dlouhodobý charakter a nosičství více klonálních linií meningokoka je vzácné. Toto mnohočetné nosičství má naopak krátkodobý charakter.

 

Na konferenci byly prezentovány dvě přednášky a dva postery, které uváděly výsledky pražského pracoviště:

 

Changing clonal distribution of Czech invasive Neisseria meningitidis isolates. (přednáška)

M. Musílek, P. Křížová, J. Kalmusová, R. Haugvicová, J. Felsberg

 

Prospective carriage study in the Czech Republic: duration of carriage and multiple carriage of Neisseria meningitidis. (přednáška)

P. Křížová, J. Kalmusová, M. Musílek, R. Haugvicová, J. Felsberg, J. Vlčková

 

Recent epidemiology of invasive meningococcal disease in the Czech Republic and vaccination strategy. (poster)

P. Křížová, J. Kalmusová, M. Musílek

 

MLST of PCR products (poster)

J. Kalmusová, P. Křížová, R. Haugvicová, J. Felsberg

 

Bylo konstatováno, že desetiletá tradice EMGM přinesla celoevropské sjednocení laboratorních metod diagnostiky meningokokového onemocnění a charakterizace meningokoků. Je rozvinut kontinuální systém kontroly kvality ve všech laboratorních metodách, který přináší jejich zkvalitnění a standardizaci. V projektech Men-Net a EU-IBIS, které se integrovaly do EMGM, vznikla řada celoevropských databází, které poskytují unikátní epidemiologické i mikrobiologické informace o meningokokovém onemocnění v Evropě (http://neisseria.org/nm/emgm/). Všichni členové EMGM mají zájem v těchto úspěšných a užitečných aktivitách pokračovat.

 

Pražská NRL se účastní ve všech projektech kontroly kvality i v obou projektech EU. Šíře a kvalita záběru pražské NRL vzbuzuje příznivý ohlas a je navázána úzká spolupráce s předními meningokokovými laboratořemi v Evropě: Oxford, Londýn, Paříž, Oslo, Athény, Wurzburg, Madrid, Varšava.

 

Pavla Křížová, Jitka Kalmusová, Martin Musílek

NRL pro meningokokové nákazy