Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2005; 15(1):41-43.
EHK 450 – Sérologie lymeské borreliózy
![]()
Zuzana
Kurzová, Dagmar Hulínská, Kateřina Baštová, Kateřina Langrová, Gabriela Lipinová
Letošního podzimního kola EHK se zúčastnilo 106 laboratoří, kterým byla doručena zásilka obsahující 5 kontrolních vzorků sér.U každého vzorku byla vyšetřována hladina IgM a IgG protilátek. Ke dni 15.11.05 se vrátily protokoly od 105 laboratoří.
Hodnocení:
Hodnocení úspěšnosti laboratoře v EHK bylo prováděno podle schématu uvedeného v tabulce 1. Nejvyšší možný počet dosažených bodů byl 20. Limit (15,41 bodu) byl stanoven jako rozdíl aritmetického průměru všech dosažených hodnot a dvojnásobku směrodatné odchylky. Správné výsledky jsou uvedeny v tabulce 2. Hodnocení EHK shrnuje tabulka 3. Tabulka 5 ukazuje úspěšnost jednotlivých diagnostických souprav a tabulka 6, chyby jednotlivých laboratoří .
Komentář:
Vzorek A byl IgM i IgG negativní. Při určování IgM protilátek chybovala u tohoto vzorku 1 laboratoř (výrobce DRG). IgG protilátky byly u tohoto vzorku určeny bezchybně.
Vzorek B byl IgM negativní a IgG pozitivní. Při určování IgM protilátek chybovala 1 laboratoř (výrobce DRG). Při stanovení IgG protilátek chybovalo 17 laboratoří (výrobce Abbott 8x, Test-Line, Viroimmun 4x, Biomedica, BAG, vlastní ELISA, Vir ELISA).
Vzorek C byl opět IgM negativní a IgG pozitivní. Při stanovení protilátek IgM chybovalo 5 laboratoří (výrobce Abbott 3x, Euroimmun, DRG). Při určování IgG protilátek chybovalo13 laboratoří (výrobce Abbott 7x, Viroimmun 2x, BAG, vlastní ELISA, Test-Line, Vir ELISA).
Vzorek D byl IgM negativní a IgG pozitivní. Při určování IgM protilátek chybovalo 27 laboratoří ( výrobce Abbott 8x, Viroimmun 4x, Milenia 2x, Euroimmun 9x, Test-Line, BAG, DRG 2x). IgG protilátky byly u tohoto vzorku určeny bezchybně.
Vzorek E byl IgM i IgG negativní. Při průkazu IgM protilátek chybovala 1 laboratoř (výrobce DRG). IgG protilátky byly určeny bezchybně.
Výsledky jsou shrnuty v tabulkách 3-4.
V tabulce 5 jsou zaznamenány výsledky EHK dle jednotlivých výrobců. Zde je třeba poznamenat, že některé laboratoře testovaly kontrolní séra diagnostickými soupravami různých výrobců. V tomto případě v EHK byli hodnoceni pouze ti výrobci, kteří byli v protokolech uvedeni na prvním místě. Maximálního počtu 20 bodů z 11 zúčastněných laboratoří dosáhly laboratoře užívající výrobky Viroimmun, Test-Line, Bag, DRG, Euroimmun, Diarorin. Ostatní výrobci patřili k úspěšným účastníkům. Mezi neúspěšné účastníky se zařadily laboratoře, které užily výrobky Abbott 6x, DRG 2x.
Tabulka 6 udává přehled chybujících laboratoří s uvedenými výsledky špatně vyšetřených vzorků. Nejčastěji (27 laboratoří) se chybovalo ve stanovení IgM protilátek u vzorku D. Protilátky IgG byly u tohoto vzorku naopak všemi účastníky určeny správně. Jednalo se o vzorek, který byl v IgG protilátkách vysoce pozitivní. Významné je i chybné určení IgM protilátek u vzorků A a E. Vzorky byly připraveny v NRL pro Lymeskou borreliózu SZÚ jako negativní kontrola pro IgM i IgG protilátky (z negativních sér pacientů a z destilované vody v poměru 2:1). Ověřeny byly (stejně jako ostatní kontrolní vzorky) metodami ELISA SZÚ Borrelia afzelii a garinii, ELISA soupravou Test–Line, ELISA soupravou Viroimmun a metodou Western blot (Virotech, Biowestern ).
Závěr:
Mezi nejčastější chyby patří
chybné určení hladiny IgM protilátek vzorku D (27účastníků), IgM a IgG protilátek u vzorku C (
V EHK–450 uspělo celkem 97 laboratoří ze 105 zúčastněných.
Příčiny chyb jsou chyby v laboratorním zpracování EHK vzorků uživatelem a zřejmě v nesprávném užití firemních souprav.
Doporučení CDC a EUCALAB užívat v diagnostických soupravách endemické kmeny prevalujících genodruhů často nejsou komerčními firmami splněny. To znamená, že firmy užívající endemický kmen izolovaný z pacientů v ČR bude splňovat lépe diagnostické požadavky než často zahraničními firmami užívané kmeny borrelií, které jsou izolované z klíšťat.
Zuzana Kurzová, Dagmar Hulínská,
Kateřina Baštová, Kateřina Langrová,
Gabriela Lipinová
NRL pro lymeskou borreliózu, SZÚ–CEM
TABULKY
Tabulka 1: Schéma hodnocení
|
Vzorek |
Výsledky
laboratoře |
||
|
Pozitivní |
Hraniční |
Negativní |
|
|
IgM negativní |
0 bodů |
1 bod |
2body |
|
IgM pozitivní |
2 body |
1 bod |
0 bodů |
|
IgG negativní |
0 bodů |
1 bod |
2 body |
|
IgG pozitivní |
2 body |
1 bod |
0 bodů |
Tabulka 2: Výsledky u jednotlivých vzorků určené NRL LB
|
|
IgM |
IgG |
|
Vzorek
A |
negativní |
negativní |
|
Vzorek
B |
negativní |
pozitivní |
|
Vzorek
C |
negativní |
pozitivní |
|
Vzorek
D |
negativní |
pozitivní |
|
Vzorek
E |
negativní |
negativní |
Tabulka 3: Výsledky EHK
|
Počet dosažených bodů |
Počet laboratoří |
|
|
20 |
72 |
68,6% |
|
19 |
11 |
10,4% |
|
18 |
5 |
4,8% |
|
17 |
5 |
4,8% |
|
16 |
4 |
3,8% |
|
15 |
1 |
0,9% |
|
14 |
5 |
4,8% |
|
13 |
2 |
1,9% |
|
celkem |
105 |
100% |
Tabulka 4: Výsledky laboratoří podle jednotlivých vzorků
|
vzorek |
Typ protilátky |
Počet laboratoří |
||
|
Správně / 2 body / |
Mírně chybné
/ 1bod / |
Chybně / 0 bodů / |
||
|
A |
IgM |
104 |
0 |
1 |
|
IgG |
105 |
0 |
0 |
|
|
B |
IgM |
104 |
1 |
0 |
|
IgG |
88 |
6 |
11 |
|
|
C |
IgM |
100 |
4 |
1 |
|
IgG |
92 |
3 |
10 |
|
|
D |
IgM |
78 |
15 |
12 |
|
IgG |
105 |
0 |
0 |
|
|
E |
IgM |
104 |
4 |
1 |
|
IgG |
105 |
0 |
0 |
|
Tabulka 5: Úspěšnost jednotlivých diagnostických souprav
|
|
Výrobce
|
Počet účastníků |
Počet úspěšných
účastníků |
Počet neúspěšných
účastníků |
||||||||
|
20 bodů |
19 bodů |
18 bodů |
17 bodů |
16 bodů |
celkem |
15 bodů |
14 bodů |
13 bodů |
celkem |
|||
|
1 |
Abbott |
8 |
0 |
0 |
0 |
1 |
1 |
2 |
0 |
4 |
2 |
6 |
|
2 |
DRG |
5 |
3 |
0 |
0 |
0 |
0 |
3 |
1 |
1 |
0 |
2 |
|
3 |
BAG |
4 |
2 |
1 |
0 |
0 |
1 |
4 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
4 |
Vlastní ELISA |
1 |
0 |
0 |
0 |
0 |
1 |
1 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
5 |
Vir ELISA |
1 |
0 |
0 |
0 |
0 |
1 |
1 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
6 |
Test-Line |
54 |
52 |
1 |
0 |
1 |
0 |
54 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
7 |
Viroimmun |
13 |
8 |
1 |
2 |
2 |
0 |
13 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
8 |
Euroimmun |
12 |
3 |
5 |
3 |
1 |
0 |
12 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
9 |
Milenia Biotec |
2 |
0 |
2 |
0 |
0 |
0 |
2 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
10 |
Biomedica |
1 |
0 |
1 |
0 |
0 |
0 |
1 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
11 |
Diasorin |
4 |
4 |
0 |
0 |
0 |
0 |
4 |
0 |
0 |
0 |
0 |
|
|
celkem |
105 |
72 |
11 |
5 |
5 |
4 |
97 |
1 |
5 |
2 |
8 |
Tabulka 6: Výsledky laboratoří s chybami
|
Číslo laboratoře |
Počet bodů |
Chybný vzorek |
Výrobce |
|
|
1 |
19 |
D IgM hraniční |
Milenia Biotec |
|
|
2 |
19 |
D IgM hraniční |
Euroimmun |
|
|
3 |
19 |
D IgM hraniční |
Euroimmun |
|
|
4 |
19 |
D IgM
hraniční |
Milenia Biotec |
|
|
5 |
19 |
D IgM hraniční |
Test-Line |
|
|
6 |
19 |
B IgG hraniční |
Biomedica |
|
|
7 |
19 |
D IgG hraniční |
Euroimmun |
|
|
8 |
19 |
D IgM hraniční |
Viroimmun |
|
|
9 |
19 |
D IgM hraniční |
Euroimmun |
|
|
10 |
19 |
D IgM hraniční |
Euroimmun |
|
|
11 |
19 |
D IgM hraniční |
BAG |
|
|
12 |
18 |
D IgM hraniční B IgG hraniční |
Viroimmun |
|
|
13 |
18 |
D IgM pozitivní |
Euroimmun |
|
|
14 |
18 |
B IgG hraniční D IgM hraniční |
Viroimmun |
|
|
15 |
18 |
D IgM pozitivní |
Euroimmun |
|
|
16 |
18 |
D IgM pozitivní |
Euroimmun |
|
|
17 |
17 |
B IgG hraniční C IgG negativní |
Test-Line |
|
|
18 |
17 |
B IgG hraniční C IgG negativní D IgM hraniční |
Viroimmun |
|
|
19 |
17 |
B IgG negativní C IgG hraniční |
Viroimmun |
|
|
20 |
17 |
C IgM hraniční D IgM pozitivní |
Euroimmun |
|
|
21 |
17 |
D IgM hraniční B IgG negativní |
Abbott |
|
|
22 |
16 |
C IgG negativní B IgG negativní |
BAG |
|
|
23 |
16 |
D IgM pozitivní C IgG hraniční B IgG hraniční |
Abbott |
|
|
24 |
16 |
C IgG negativní B IgG negativní |
vlastní ELISA |
|
|
25 |
16 |
C IgG negativní B IgG negativní |
Vir ELISA |
|
|
Číslo laboratoře |
Počet bodů |
Chybný vzorek |
Výrobce |
|
26 |
15 |
A IgM
pozitivní B IgM
hraniční D IgM
pozitivní |
DRG |
|
27 |
14 |
B IgG
negativní C IgG
negativní D IgM
pozitivní |
Abbott |
|
28 |
14 |
B IgG
negativní C IgG
negativní D IgM
pozitivní |
Abbott |
|
29 |
14 |
C IgG
negativní D IgM
pozitivní B IgG
negativní |
Abbott |
|
30 |
14 |
B IgG
negativní D IgM
hraniční C IgM
hraniční C IgG
negativní |
Abbott |
|
31 |
14 |
C IgM
pozitivní E IgM
pozitivní D IgM
pozitivní |
DRG |
|
32 |
13 |
C IgM
hraniční C IgG
negativní D IgM
pozitivní B IgG
negativní |
Abbott |
|
33 |
13 |
D IgM
pozitivní C IgM
hraniční C IgG
negativní B IgG
negativní |
Abbott |