Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2005; 15(1):41-43.

 

EHK 450 – Sérologie lymeské borreliózy

                                        

Zuzana Kurzová, Dagmar Hulínská, Kateřina Baštová, Kateřina Langrová, Gabriela Lipinová

 

 Letošního podzimního kola EHK se zúčastnilo 106 laboratoří, kterým  byla doručena zásilka obsahující 5 kontrolních vzorků sér.U každého vzorku byla vyšetřována hladina IgM a IgG protilátek. Ke dni 15.11.05 se vrátily protokoly od 105 laboratoří.                                                                                                                                       

 

Hodnocení:

Hodnocení úspěšnosti laboratoře v EHK bylo prováděno podle schématu uvedeného v tabulce 1. Nejvyšší možný počet dosažených bodů byl 20. Limit (15,41 bodu) byl stanoven jako rozdíl aritmetického průměru všech dosažených hodnot a dvojnásobku směrodatné odchylky. Správné výsledky jsou uvedeny v tabulce 2. Hodnocení EHK shrnuje tabulka 3. Tabulka 5 ukazuje úspěšnost jednotlivých diagnostických souprav a tabulka 6, chyby jednotlivých laboratoří .

 

 

Komentář:

Vzorek A byl IgM i IgG negativní. Při určování IgM protilátek chybovala u tohoto vzorku 1 laboratoř (výrobce DRG). IgG protilátky byly u tohoto vzorku určeny bezchybně.

Vzorek B byl IgM negativní a IgG pozitivní. Při určování IgM protilátek chybovala 1 laboratoř (výrobce DRG). Při stanovení IgG protilátek chybovalo 17 laboratoří (výrobce Abbott 8x, Test-Line, Viroimmun 4x, Biomedica, BAG, vlastní ELISA, Vir ELISA).

Vzorek C byl opět IgM negativní a IgG pozitivní. Při stanovení protilátek IgM chybovalo 5 laboratoří (výrobce Abbott 3x, Euroimmun, DRG). Při určování IgG protilátek chybovalo13 laboratoří (výrobce Abbott 7x, Viroimmun 2x, BAG, vlastní ELISA, Test-Line, Vir ELISA).

Vzorek D byl IgM negativní a IgG pozitivní. Při určování IgM protilátek chybovalo 27 laboratoří ( výrobce Abbott 8x, Viroimmun 4x, Milenia 2x, Euroimmun 9x, Test-Line, BAG, DRG 2x). IgG protilátky byly u tohoto vzorku určeny bezchybně.

Vzorek E byl IgM i IgG negativní. Při průkazu IgM protilátek chybovala 1 laboratoř (výrobce DRG). IgG protilátky byly určeny bezchybně.

 

Výsledky jsou shrnuty v tabulkách 3-4.

 

V tabulce 5 jsou zaznamenány výsledky EHK dle jednotlivých výrobců. Zde je třeba poznamenat, že některé laboratoře testovaly kontrolní séra diagnostickými soupravami  různých  výrobců. V tomto případě v EHK byli  hodnoceni pouze ti výrobci, kteří byli v protokolech uvedeni na prvním místě. Maximálního počtu 20 bodů  z 11 zúčastněných laboratoří dosáhly laboratoře užívající výrobky Viroimmun, Test-Line, Bag, DRG, Euroimmun, Diarorin. Ostatní výrobci patřili k úspěšným účastníkům. Mezi neúspěšné účastníky se zařadily laboratoře, které užily výrobky Abbott 6x, DRG 2x.

 

Tabulka 6 udává přehled chybujících laboratoří s uvedenými výsledky špatně vyšetřených vzorků. Nejčastěji (27 laboratoří)  se chybovalo ve stanovení IgM protilátek u vzorku D. Protilátky IgG byly u tohoto vzorku naopak všemi účastníky určeny správně. Jednalo se o vzorek, který byl v IgG protilátkách vysoce pozitivní. Významné je i chybné určení IgM protilátek u vzorků A a E.  Vzorky byly připraveny v NRL pro Lymeskou borreliózu SZÚ jako negativní kontrola pro IgM i IgG protilátky (z negativních sér pacientů a z destilované vody  v poměru  2:1). Ověřeny byly (stejně jako ostatní kontrolní vzorky) metodami ELISA SZÚ Borrelia afzelii a garinii, ELISA soupravou Test–Line, ELISA soupravou Viroimmun a metodou Western blot (Virotech, Biowestern ).

 

Závěr:

Mezi nejčastější chyby patří chybné určení hladiny IgM protilátek vzorku D (27účastníků), IgM  a IgG protilátek u vzorku C (5 a 13 účastníků) a IgG  protilátek u vzorku B (17účastníků)

 

V EHK–450 uspělo celkem 97 laboratoří ze 105 zúčastněných.

 

Příčiny chyb jsou  chyby v laboratorním zpracování EHK vzorků uživatelem a zřejmě v nesprávném užití firemních souprav.

 

Doporučení CDC a EUCALAB užívat v diagnostických soupravách endemické kmeny prevalujících genodruhů často nejsou komerčními firmami splněny. To znamená, že firmy užívající endemický kmen izolovaný z pacientů v ČR bude splňovat lépe diagnostické požadavky než často zahraničními firmami užívané kmeny borrelií, které jsou izolované z klíšťat.

 

 

Zuzana Kurzová, Dagmar Hulínská,

Kateřina Baštová, Kateřina Langrová,

Gabriela Lipinová

NRL pro lymeskou borreliózu, SZÚ–CEM

 

 

TABULKY

 

Tabulka 1: Schéma hodnocení

 

Vzorek

Výsledky  laboratoře

Pozitivní

Hraniční

Negativní

IgM negativní

0 bodů

1 bod

2body

IgM pozitivní

2 body

1 bod

0 bodů

IgG negativní

0 bodů

1 bod

2 body

IgG pozitivní

2 body

1 bod

0 bodů

 

 

Tabulka 2: Výsledky u jednotlivých vzorků určené NRL LB

 

 

     IgM

    IgG

Vzorek A

   negativní

negativní

Vzorek B

   negativní

pozitivní

Vzorek C

   negativní

pozitivní

Vzorek D

   negativní

pozitivní

Vzorek E

   negativní

negativní

 

 

Tabulka 3: Výsledky EHK

 

Počet dosažených bodů

Počet laboratoří

20

72

68,6%

19

11

10,4%

18

5

4,8%

17

5

4,8%

16

4

3,8%

15

1

0,9%

14

5

4,8%

13

2

1,9%

celkem

105

100%

 

 

 

Tabulka 4: Výsledky laboratoří podle jednotlivých vzorků

 

vzorek

Typ protilátky

Počet laboratoří

Správně                   / 2 body /

Mírně chybné         / 1bod /

Chybně                  / 0 bodů /

A

IgM

104

0

1

IgG

105

0

0

B

IgM

104

1

0

IgG

88

6

11

C

IgM

100

4

1

IgG

92

3

10

D

IgM

78

15

12

IgG

105

0

0

E

IgM

104

4

1

IgG

105

0

0

 

 

 

Tabulka 5: Úspěšnost jednotlivých diagnostických souprav

 

 

 

Výrobce

Počet

účastníků

Počet úspěšných účastníků

Počet neúspěšných účastníků

20

bodů

19

bodů

18 bodů

17 bodů

16 bodů

celkem

15

bodů

14

bodů

13

bodů

celkem

1

Abbott

8

0

0

0

1

1

2

0

4

2

6

2

DRG

5

3

0

0

0

0

3

1

1

0

2

3

BAG

4

2

1

0

0

1

4

0

0

0

0

4

Vlastní ELISA

1

0

0

0

0

1

1

0

0

0

0

5

Vir ELISA

1

0

0

0

0

1

1

0

0

0

0

6

Test-Line

54

52

1

0

1

0

54

0

0

0

0

7

Viroimmun

13

8

1

2

2

0

13

0

0

0

0

8

Euroimmun

12

3

5

3

1

0

12

0

0

0

0

9

Milenia Biotec

2

0

2

0

0

0

2

0

0

0

0

10

Biomedica

1

0

1

0

0

0

1

0

0

0

0

11

Diasorin

4

4

0

0

0

0

4

0

0

0

0

 

celkem

105

72

11

5

5

4

97

1

5

2

8

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Tabulka 6: Výsledky laboratoří s chybami  

 

Číslo

laboratoře

Počet

bodů

Chybný vzorek

Výrobce

 

1

19

D   IgM hraniční

Milenia Biotec

 

2

19

D   IgM hraniční

Euroimmun

 

3

19

D   IgM hraniční

Euroimmun

 

4

19

D   IgM hraniční

Milenia Biotec

 

5

19

D   IgM hraniční

Test-Line

 

6

19

B   IgG hraniční

Biomedica

 

7

19

D   IgG hraniční

Euroimmun

 

8

19

D   IgM hraniční

Viroimmun

 

9

19

D   IgM hraniční

Euroimmun

 

10

19

D   IgM hraniční

Euroimmun

 

11

19

D   IgM hraniční

BAG

 

12

18

D   IgM hraniční

B   IgG hraniční

Viroimmun

13

18

D   IgM pozitivní

Euroimmun

14

18

B   IgG hraniční

D   IgM hraniční

Viroimmun

15

18

D   IgM pozitivní

Euroimmun

16

18

D   IgM pozitivní

Euroimmun

17

17

B   IgG hraniční

C   IgG negativní

Test-Line

18

17

B   IgG hraniční

C   IgG negativní

D   IgM hraniční

Viroimmun

19

17

B   IgG negativní

C   IgG hraniční

Viroimmun

20

17

C   IgM hraniční

D   IgM pozitivní

Euroimmun

21

17

D   IgM hraniční

B   IgG negativní

Abbott

22

16

C   IgG negativní

B   IgG negativní

BAG

23

16

D   IgM pozitivní

C   IgG hraniční

B   IgG hraniční

Abbott

24

16

C   IgG negativní

B   IgG negativní

vlastní ELISA

25

16

C   IgG negativní

B   IgG negativní

Vir ELISA

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Limit 15,41 bodu

 

Číslo laboratoře

 

Počet

bodů

Chybný vzorek

Výrobce

26

15

A   IgM pozitivní

B   IgM hraniční

D   IgM pozitivní

DRG

27

14

B   IgG negativní

C   IgG negativní

D   IgM pozitivní

Abbott

28

14

B   IgG negativní

C   IgG negativní

D   IgM pozitivní

Abbott

29

14

C   IgG negativní

D   IgM pozitivní

B   IgG negativní

Abbott

30

14

B   IgG negativní

D   IgM hraniční

C   IgM hraniční

C   IgG negativní

Abbott

31

14

C   IgM pozitivní

E    IgM pozitivní

D   IgM pozitivní

DRG

32

13

C   IgM hraniční

C   IgG negativní

D   IgM pozitivní

B   IgG negativní

Abbott

33

13

D   IgM pozitivní

C   IgM hraniční

C   IgG negativní

B   IgG negativní

Abbott