Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2006; 15(5): 208 – 209.
Radomíra Limberková, Irena Matyášová
Vzorky pro externí hodnocení kvality, virovou identifikaci, připravily spolupracující Národní referenční laboratoře pro chřipku, pro nechřipkové respirační viry a pro enteroviry. Zúčastněné laboratoře obdržely zásilku pěti vzorků simulující klinické materiály doprovázené legendou zahrnující pohlaví a věk pacienta, klinickou diagnózu a druh klinického vzorku – nasopharyngeální výtěr nebo izolát ze stolice či moku.
Série EHK – 468 se zúčastnilo 15 laboratoří, kterým bylo zasláno 5 vzorků (3 vzorky enterovirů a 2 vzorky respiračních virů) k určení virového agens klasickými metodami izolace virů a rychlými metodami průkazu virových antigenů podle možností jednotlivých pracovišť. Od všech pracovišť se v požadovaném termínu vrátily výsledkové protokoly k vyhodnocení. Dvě laboratoře neprovádějí vyšetřování enterovirových nákaz a zpracovaly tudíž pouze respirační vzorky.
Každý vzorek byl hodnocen v rozmezí 0-2 body
Správný výsledek…………………. 2 body
Částečně správný výsledek……….. 1 bod
Nesprávný výsledek………………. 0 bodů
Maximální počet získaných bodů byl 10, respektive 4 ( pro laboratoře neprovádějící vyšetřování enterovirů).
Správně určeno: 14/15 93,33%
(jednou určeno jako influenza B)
Správně určeno: 15/15 100 %
Správně určeno: 13/13 100 %
(dvě pracoviště neprovádějí vyšetření enterovirových nákaz)
Správně určeno: 13/13 100 %
(dvě pracoviště neprovádějí vyšetření enterovirových nákaz)
Správně určeno: 13/13 100 %
(dvě pracoviště neprovádějí vyšetření enterovirových nákaz)
Enteroviry – maximální počet bodů 6 13 laboratoří
2 laboratoře neprovádějí diagnostiku enterovirů
Respirační viry – maximální počet bodů 4 14 laboratoří
2 1 laboratoř
Celkové hodnocení
10 bodů získalo 12 laboratoří
8 bodů získala 1 laboratoř
4 body získaly 2 laboratoře (jen za respirační vzorky)
Limitní počet
získaných bodů pro úspěšné absolvování EHK-468 pro enteroviry byl
V určování enterovirů nebyly zjištěny žádné potíže, ve všech 13 laboratořích, které vyšetřují enterovirové nákazy, se provádějí izolační pokusy na tkáňových kulturách a úspěšnost byla stoprocentní. Následná identifikace již probíhá v NRL pro enteroviry.
V bloku respiračních virů nečinilo vyšetření vzorků problémy a kromě jedné laboratoře všechna pracoviště získala plný počet bodů. Vyšetření byla prováděna metodou ELISA i expresními metodami. Kultivaci respiračních virů běžně provádí 11 zúčastněných laboratoří, u 8 z nich bylo dosaženo pozitivního výsledku, zbylé laboratoře nepracují s linií MDCK vnímavou pro viry influenzy, a proto se jim nepodařilo virus influenzy typu B úspěšně pomnožit..
Souhrnně lze říci, že série EHK-468 dopadla velice úspěšně pro všechny zúčastněné laboratoře. Níže uvedený přehled diagnostik používaných jednotlivými laboratořemi byl sestaven na základě informací, které na svých výsledkových protokolech uvedla jednotlivá pracoviště. Tento přehled je doplněn informací o rutinně používaných diagnosticích v referenčních laboratořích.
Přehled používaných
metod pro diagnostiku enterovirů v národní referenční laboratoři
NRL používá všechny výše zmíněné typy tkáňových kultur, protože provádí následnou identifikaci kmenů izolovaných terénními laboratořemi na tkáňových kulturách, na nichž byl enterovirus izolován.
Přehled používaných metod pro diagnostiku respiračních virů v zúčastněných laboratořích
1. Tkáňové kultury: LEP (9x), MK2 (7x), MDCK (7x), VERO, Hep-2,CV-1, HeLa
2. Kultivace v kuřecím embryu
3. Monofluokit infl.
4. ELISA Quadrogen, Virion
5. PIF DAKO Imagen Influ virus A a B
( 10. Eliset SZÚ chřipka A, B, AV, RSV, PIV – 1,3 )
Přehled metod používaných v národních referenčních laboratořích pro rutinní diagnostiku respiračních virů
1. Tkáňové kultury: L 132, MK2, MDCK
2. Kultivace v kuřecím embyu
3. Eliset SZÚ chřipka A, B, AV, RSV, PIV – 1,3
pro konfirmaci: Quick vue Influ A+B Denka Seiken,
RSV-Respistrip, AV- Respistrip
MUDr. Radomíra
Limberková
RNDr. Irena Matyášová,
CSc.
SZÚ-CEM