Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2006; 15(7): 298 – 301.

 

Průkaz antichlamydiových protilátek u dětské populace

Detection of anti-chlamydial antibodies in the children population

 

Ljuba Janečková, Kateřina Roubalová, Felix Votava, Vladimír Volf, Iva Nováková,  Magdalena Srbová

 

Souhrn · Summary

Cílem studie byla detekce antichlamydiových IgG, IgA a IgM protilátek u dětské populace (pacienti FN KV dětské oddělení) a určení séroprevalence antichlamydiových protilátek v této skupině pacientů. Séra byla vyšetřena rodově specifickými (test ELISA) a druhově specifickými testy (mikroimunofluorescenční test). Protilátky IgG, IgA a IgM  Chlamydia pneumoniae byly prokázány již ve věkové skupině 1-6 let, s výrazným vzestupem u starších děti, séroprevalence se pohybovala mezi 7,4 % (předškolní děti) až 19,7 % (starší děti).

Protilátky proti Chl. trachomatis a Chl. psittaci nebyly detekovány. U 20 osob (ze 180 vyšetřených) byla sérologicky prokázána suspektní/akutní infekce Chl. pneumoniae .

 

The study objectives were to detect antichlamydial  IgG, IgA and IgM antibodies

in the children population (inpatients of the Kralovske Vinohrady University Hospital) and to determine their seroprevalence rates in this group.

The sera were tested by a genus specific ELISA and a species specific microimmunofluorescence method. IgG,IgA and IgM antibodies against C. pneumoniae were  detected already in the age group 1-6 years, with a clear upward trend among older children, the seroprevalence rates varied between 7.4 % in pre-school children and 19.7% at older age.

IgG, IgA, IgM antibodies against C. trachomatis and C. psittaci were not detected. Suspected/acute C.pneumoniae infection was revealed in 20 of 180 tested subjects.

 

Úvod

 

Chlamydie, které jsou  řazeny mezi gramnegativní bakterie, jsou obligatorní intracelulární parazité. Rod Chlamydia má 4 známé druhy :

 

Chlamydia trachomatis (CTR),

Chlamydia pneumoniae (CPN), dle nové klasifikace Chlamydophyla  pneumoniae, Chlamydia psittaci (CPS), novější název Chlamydophyla psittaci,

Chlamydia pecorum (CPC).

 

V humánní medicíně mají hlavní význam Chlamydia trachomatis (CTR)  a Chlamydia pneumoniae (CPN) , které jsou lidskými patogeny.

Chlamydia psittaci (CPS) – je primárně zvířecí patogen s možností přenosu na člověka.

 

Chlamydia trachomatis  (CTR)  je nejčastějším sexuálně přenášeným bakteriálním patogenem a původcem pohlavních chorob (STD- Sexually Transmitted Diseases) na světě. Podle Světové zdravotnické organizace(WHO) každoročně vzniká asi 500 milionů nových případů sexuálně přenosných onemocnění a  přibližně u 90 milionů těchto infekcí je původcem Chl. trachomatis. Nejvíce ohroženou skupinou jsou mladí lidé jak mužského tak i ženského pohlaví, nejvíce ve věkové skupině 15 – 30 let. CTR je nejčastější příčinou neplodnosti u žen i u mužů. Urogenitální chlamydiové infekce často probíhají ve formě tzv. postgonokokového zánětu. Cervikální chlamydiová infekce je v současné době považována za jeden z rizikových faktorů pro vznik karcinomu děložního hrdla ze skvamózních buněk (Squamous Cell Carcinoma – SCC). V dospělosti může CTR způsobovat akutní nebo subakutní folikulární konjunktivitidu, která může progredovat v keratitis punctata. Ophthalmia neonatorum je komplikací u dětí narozených infikovaným matkám. Klinika viz webové stránky SZÚ-CEM:  www.szu.cz/cem/nrlcem.htm.

 

Chlamydia trachomatis se přenáší vaginálním, orálním i análním stykem.

Inkubační doba: 1 – 3  týdny.

Rizikové faktory: nedodržování zásad bezpečného sexu a udržování kontaktu s více sexuálními partnery. Onemocnění u člověka, která jsou způsobená CTR: trachom (sérotypy A-C), lymphogranuloma venereum (sérotypy L1-L3), urogenitální a oční infekce (sérotypy D-K).

 

Chlamydia psittaci (CPS) – je primárně zvířecí patogen s možností přenosu na člověka. Agens se vyskytuje u ptáků (papoušci, holubi atd.) a savců (skot, ovce, kozy, koně, prasata, kočky atd.). Může způsobit lidská onemocnění probíhající pod obrazem atypické pneumonie (ptačí kmeny)  anebo placentitidy (savčí kmeny). Je to prozatím jediná chlamydiová infekce, která podléhá povinnému hlášení.  Infekce je přenášena nejčastěji kontaminovaným trusem nebo peřím.

 

Chlamydia pneumoniae (CPN)    je ze všech druhů chlamydií v lidské populaci nejrozšířenější. Během posledních let je zvýšen počet akutních i chronických onemocnění, která jsou uváděna v souvislosti s infekcí CPN. Jsou to onemocnění nejen respiračního traktu, ale i mimorespirační. 

Cesta přenosu: kapénková infekce nebo přímý kontakt.

Inkubační doba: 1 - 3 týdny.

Většinou k primoinfekci dochází mezi 5. až 18. rokem života . Nejčastějšími klinickými projevy infekce jsou: rhinitis, sinusitis, otitis media, pharingitis, bronchitis, atypická pneumonie s neproduktivním kašlem a nevýrazným poslechovým nálezem. Laboratorně mohou být lehce zvýšené zánětlivé markery (FW, CRP), v krevním obraze – normální nebo snížený počet leukocytů s lymfocytózou. Onemocnění má často mírný průběh s přetrvávajícím kašlem.

 

Chlamydie mohou dlouhodobě perzistovat v makrofázích, které  mohou být vektorem šíření patogenu a následně zdrojem perzistentních infekcí. Agens pravděpodobně není pořád přítomno v  populaci, existují náznaky periodicity – každé 2 – 3 roky je vyšší incidence, která se střídá každých 4 – 5 let s nízkou incidencí onemocnění vyvolaných chlamydiemi.

 

Z literatury jsou známy i epidemie pneumonií (v Seattlu 1990-1991, ve Finsku – 4 epidemie CPN v letech 1957-1985 ve vojenských posádkách).

 

Většinou infekci prodělá celosvětově dospělá populace jednou anebo i vícekrát za život.

Promořenost dospělé populace je dle některých autorů 70-80%.

 

Léčba : ambulantně  u nekomplikovaných případů a u těžších průběhů hospitalizace ve stacionáři. Nejvyšší účinnost proti chlamydiím vykazují makrolidová ATB, tetracykliny. Alternativně možno použít i  chinolony 2. a 3. generace. Léčba infekcí vyvolaných CPN se doporučuje po dobu 14 – 21 dní. Respirační onemocnění vyvolaná chlamydiemi mají dobrou prognózu.

 

Materiál a metody

 

V NRL pro chlamydie se používají tyto laboratorní metody diagnostiky :

 

·       Detekce rodově i druhově specifických  protilátek:

1).  MIF ( mikroimunofluorescenční test, druhově specifický test ) firma Focus

            -     anti Chlamydia pneumoniae IgG, IgA, IgM

-        anti Chlamydia trachomatis IgG, IgA, IgM

-        anti Chlamydia psittaci IgG, IgA, IgM

            2).  ELISA test (rodově specifický test) firma Medac

-        anti Chlamydia IgG, IgA, IgM

·       Přímý průkaz Chlamydia pneumoniae (CPN) a Chlamydia trachomatis (CTR):

1) Přímý průkaz  DNA Chlamydia trachomatis a Chlamydia pneumoniae

                  metodou PCR ,

2) Detekce antigenů CPN a CTR imunofluorescenčním testem (IF test)

 

Od ledna 2005 sledujeme 4 velké skupiny pacientů s podezřením na chlamydiózy:

1. skupina: pacienti s urogenitální symptomatikou,

2. skupina: pacienti s ophthalmologickými potížemi, 

3. skupina: pacienti s jinými chronickými potížemi a/nebo akutními stavy, u kterých praktičtí, event. odborní lékaři nevylučují i chlamydiovou etiologii těchto stavů,

4. skupina: pacienti FN KV – dětská klinika Hagibor.

 

V tomto článku chceme prezentovat výsledky vyšetření pacientů 4. skupiny (pacienti FN KV – dětská klinika Hagibor) a zároveň potvrdit skutečnost, že i dětská populace má protilátky proti Chl. pneumoniae už od ranného věku, a že séroprevalence s věkem stoupá (viz tabulka 2)

 

Výsledky

 

Celkem bylo vyšetřeno 180 vzorků sér od dětí s podezřením na chlamydiovou infekci. Ve většině případů nám pediatři zasílají srážlivou krev, sérum pro průkaz chlamydiových protilátek a v některých případech i nasofaryngeální výtěry, konjunktivální stěry pro přímý průkaz antigenu a DNA Chl. pneumoniae. Naše laboratoř provádí komplexní sérologické vyšetření na chlamydie, zahrnující jak ELISA test, detekující protilátky proti skupinově společnému LPS antigenu, tak i MIF – mikroimunofluorescenční test pro detekci druhově specifických protilátek (Chl. pneumoniae, Chl.trachomatis a Chl. psittaci) ve třídách IgG, IgA a IgM. Z celkového počtu vyšetřených sér bylo pozitivních 23 (12,8 %), kdy byly detekovány vysoké titry IgG a IgA protilátky proti Chlamydia pneumoniae.  Protilátky proti Chl. trachomatis a Chl. psittaci nebyly prokázány v žádném ze vzorků.

 

Tabulka  1: Výsledky vyšetřených sér pacientů

 

Protilátky

Celkem

vyšetřeno

Chl.pneumoniae

 

Chl.trachomatis

 

Chl. psittaci

poz.

neg.

%

poz.

neg.

%

poz.

neg.

%

IgG

180

23

157

12,8

0

0

0

0

0

0

IgA

180

20

160

11,1

0

0

0

0

0

0

IgM

180

6

174

3,3

0

0

0

0

0

0

 

Tabulka  2: Výsledky vyšetřených sér na protilátky proti Chl. pneumoniae (dle věku)

 

věk

vyšetřeno

pozitivních

%

0 – 1

36

3

8,3

1 – 6 (předškolní děti)

68

5

7,4

nad 7 let

76

15

19,7

Celkem

180

23

12,8

 

 

Graf 1 : Celkový počet vyšetření a počet pozitivních sér u dětských pacientů (dle věku)

 

 

     Graf potvrzuje dosti vysokou promořenost bakterií Chl. pneumoniae i u dětské populace.

Séroprevalence protilátek proti CPN stoupá od 7,4 % u dětí předškolního věku na 19,7 % ve věkové skupině nad 7 let. V grafu je znázorněna i pozitivita u dětí do 1 roku (z 36 vyšetřených byly 3 pozitivních výsledky) – v tomto případě se jedná o mateřské imunoglobuliny (v prvních 6 – 8 měsících věku je možná přítomnost transplacentárně přenesených protilátek od matky).

 

Tabulka 3 : Výsledky vyšetřených sér na protilátky proti Chl. pneumoniae (dle diagnóz):

 

Diagnóza

vyšetřeno

pozitivních

J 18 - Pneumonie

20

5

J 10 - Chřipka

2

1

J 20 – Bronchitis acuta

25

2

J 30 - Rhinitis

6

1

J 39 – Jiné nemoci HCD

20

1

J 45 – Astma bronchiale

13

2

R 05 - Kašel

44

6

L 04 – Lymphadenitis acuta

1

1

L 20 – Atopická dermatitida

1

1

 

 

 

 

 

 

Graf  2:  Výsledky vyšetřených sér na protilátky proti Chl. pneumoniae (dle diagnóz):


Z tabulky 3 a grafu 2 je vidět, že nejvíce pozitivních výsledků (sérologie) bylo u pacientů s diagnózami: J 18 - pneumoniae (z 20 vyšetřených bylo 5 séropozitivních) , J 20 – bronchitis acuta (z 25 vyšetřených – 2 pozitivní), R 05 – kašel nejasné etiologie (z 44 vyšetřených – 6 pozitivních), J 45 – astma bronchiale (z 13 vyš – 2 séropozitivní). Tato čísla jsou  přesvědčivým důkazem častých respiračních infekci chlamydiové etiologie i u dětské populace a jak je vidět, více jsou postiženy DCD.

 

Závěr

 

Infekce vyvolané Chlamydia pneumoniae jsou velmi časté. Z výsledků dřívějších séroepidemiologických studií vyplývá, že chlamydiovou infekci prodělá většina celosvětové populace jednou anebo i vícekrát během života. Dle literatury v USA a Evropě je séroprevalence vysoká i u dětské populace (mezi 5. - 15. rokem života:  5 až 10 %, kolem 20 let se pohybuje kolem 50% a pak narůstá a v dospělosti dosahuje až 70 - 80 %).

 

Cílem naší studie byla detekce antichlamydiových protilátek u dětských pacientů (FN KV – dětské oddělení) a určení séroprevalence antichlamydiových protilátek v této skupině pacientů. Celkem bylo vyšetřeno 180 vzorků sér od dětí s podezřením na chlamydiovou infekci. Séra byla testovaná paralelně rodově i druhově specifickými testy: ELISA test – detekující protilátky proti skupinově společnému LPS antigenu a MIF - mikroimuno-fluorescenční test – detekce druhově specifických protilátek (CPN, CTR, CPS) ve třídách IgG, IgA a IgM.

 

Z celkového počtu vyšetřených sér (180) bylo pozitivních 23 (12,8%), kdy byly detekovány vysoké titry IgG , IgA, IgM  protilátek proti Chl. pneumoniae. IgG protilátky proti CPN byly prokázány v 23 (12,8%) vzorcích, IgA protilátky v 20 (11,1%) a IgM v 6 (3,3%). Nejvíce pozitivních výsledků bylo ve skupině nad 7 let (15 z 76 vyšetřených – 19,7 %) a ve skupině předškolních dětí - 5 pozitivních z 68 vyšetřených – 7,4%. Protilátky proti Chl. trachomatis a Chl. psittaci nebyly detekovány v žádném případě.

Výsledky naší studie potvrdily, vysokou promořenost dětské populace chlamydiemi (Chl. pneumoniae). Séroprevalence chlamydiových protilátek proti Chl.  pneumoniae stoupá od 7,4 % u dětí předškolního věku na 19,7 % ve věkové skupině nad 7 let.

 

LITERATURA

 

·       Bamba Masahiro et all.  Prospective surveillance for atypical pathogens in children with community acquired pneumonia in Japan.  Journal of infection and chemotherapy 2006;  12(1): 36-41. 

·       Hermann H, et all.  Clinical significance of antibodies against the lipopolysaccharide of Chlamydia in children with acute respiratory diseases. In: Proceedings 3 Meeting of the European Society for Chlamydia Research, Austrian Society for Dermatology and Venerology 1996; 54(3): 233.

·       Olesen T. Chlamydia among children and adolescents. Ugeskrift for laeger  2005; 167(4): 4482 – 4483.

·       Haidl S, et all. Longitudinal pattern of antibodies to Chlamydia pneumoniae in children. Proceedings of 8 International Symposium on Human Chlamydian Infections, Esculapio. 1994; p. 189-192.

·       Podsiadly E, et all. Seroepidemiological studies of Chlamydia pneumoniae infections in 1-36 months old children with respiratory tract infections and other diseases in Poland. Polish journal of microbiology 2005; 54(3): 215 – 219. 

·       Vajdic CM, et all. The prevalence of genital Chlamydia trachomatis in Australia 1997-2004: a systematic review. Sexual health  2005; 2(3): 169 – 83.

·       Richeldi L, et all. Macrolides for chronic asthma. Cochrane database of systematic reviews (Online)  2005; (4): p CD002997  Date of Electronic Publication: 20051019.

·       Medková Z, a kol. Chlamydiové infekce. Triton, 2001.

·       Korych B. Chlamydie a jimi vyvolané infekce. Remedia Klin Mikrobiol 1998; 2(3): 72-74.

·       Žampachová E. Chlamydia pneumoniae jako původce respiračních infekci. Klin Mikrobiol Inf Lék  1998; 2(2): 54-56.

·       Pospíšil L. a kol. Prevalence chlamydiové infekce u osob z exponovaného prostředí. Remedia Klin Mikrobiol 1998; 2(3): 83-86.

·       Sodja I. Sérologický přehled chlamydiových protilátek. Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 1998; 7 (Příloha 1): 34-36.

·       Mašata J, Řezáčová J, Drbohlav P, Urogenitální chlamydiové infekce. Prakt gynekol 2001;  (3): 27-31.

·        Volanen I, et all: Serum lipid profiles poorly correlate with Chlamydia pneumoniae, Helicobacter pylori and cytomegalovirus seropositivity in prospectively followed-up healthy children. Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology 2005; 25(4): 827-832.

 

 

MUDr. Ljuba Janečková, RNDr. Kateřina Roubalová, CSc.

NRL pro chamydie SZÚ – CEM, Praha

 

MUDr. Felix Votava, MUDr. Vladimír Volf, MUDr. Iva Nováková,  MUDr. Magdalena Srbová

Klinika pro děti a dorost, FN KV, Praha