Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2006; 15(7): 293 – 296.

 

Souhrnná zpráva o výsledcích pilotní studie ke zkvalitnění virologického programu surveillance

akutních respiračních infekcí v sezóně 2005/2006

Summary report on results of a pilot study to improve quality of the virological surveillance program in acute respiratory infections in the season 2005/2006

 

Marie Otavová, Martina Havlíčková

 

Souhrn · Summary

Autoři shrnují výsledky pilotní studie zaměřené na zkvalitnění virologického programu surveillance akutních respiračních infekcí (ARI) v České republice. Pilotní studie, která probíhá již druhou epidemickou sezónu, se na pokyn hlavního hygienika ČR zúčastnily všechny kraje s výjimkou Plzeňského kraje a Prahy, kde sběr materiálu již dlouhodobě a uspokojivě funguje. V období od listopadu 2005 do dubna 2006 bylo odebráno a vyšetřeno celkem 507 nazofaryngeálních výtěrů pacientů různých věkových skupin. Přímou detekcí antigenů sledovaných respiračních virů (viry chřipky, parainfluenzy, adenoviry, RS virus, herpetické viry) nebo jejich izolací ve vhodných buněčných kulturách byla prokázána pozitivita u 96 odebraných vzorků (4x virus chřipky typu A, 84x typu B, 4x viry parainfluenzy a 4x herpetické viry). K výtěrům od 38 pacientů byla získána i párová séra. V této skupině byla infekce virem chřipky typu A prokázána v 1 případě, chřipky typu B v 8 případech a infekce Mycoplasma pneumonie ve 2 případech.

Pilotní studie probíhá již druhým rokem a získané výsledky potvrzují schopnost zajistit sběr a vyšetření klinického materiálu po dobu celé epidemické sezóny dle kritérií stanovených pokynem hlavního hygienika ČR. Stejně jako v loňském roce byly získány izoláty viru chřipky z různých oblastí republiky, což zvláště v letošní sezóně s velmi netypickým výskytem viru chřipky umožnilo lépe monitorovat cirkulaci tohoto viru na území ČR.

 

The authors summarize results of a pilot study to improve quality of the virological surveillance program in acute respiratory infections (ARI) in the Czech Republic. In line with the instructions of the Chief Public Health Officer of the Czech Republic, all administrative regions participated in the pilot study, which is in progress for two epidemic seasons, but Plzeň and Prague where specimens have been collected adequately on a long-term basis.  From November 2005 to April 2006, as many as  507 nasopharyngeal swab specimens were collected from patients of different age groups and analyzed. Either direct detection of antigens of the monitored respiratory viruses (influenza and parainfluenza viruses, adenoviruses, RS virus, herpesviruses) or isolation in suitable cell cultures were positive for 96 collected specimens, with detection of type A influenza virus in 4 specimens, type B influenza virus in 84 specimens, and parainfluenza virus and herpesvirus in 4 specimens each. Paired sera were collected from 38 patients whose swab specimens had been obtained previously. In this group, type A influenza virus infection was detected in one patient, type B influenza infection was found in 8 patients and 2 patients showed positivity for  Mycoplasma pneumoniae infection.

The pilot study is in progress for two years and the results confirmed competence in collection and analysis of clinical specimens throughout the entire epidemic season according to the criteria set in the instruction of the Chief Public Health Officer of the Czech Republic. Similarly as in the previous year, influenza virus isolates were obtained from different regions which makes it possible to better monitor circulation of this virus within the Czech Republic.

 

Program pilotní studie byl zahájen ve 44. kalendářním týdnu (KT) 2005 (listopad) a ukončen v 17. KT 2006 (duben). S výjimkou Plzeňského kraje a Prahy (v těchto regionech sběr materiálu funguje již dlouhodobě a na uspokojivé úrovni) zajistil každý kraj odběr dvou nazofaryngeálních výtěrů týdně, v době zvýšeného výskytu či při mimořádné epidemiologické situaci pak dle okolností a domluvy. Odběrová média jednotlivým krajům poskytoval průběžně SZÚ, rovněž doprava materiálů k vyšetření byla hrazena z prostředků SZÚ. Uplatnily se dvě možnosti transportu vzorků – kurýrní přeprava (TNT) i doprava sanitními vozy. 

Materiál byl vyšetřen screeningově metodou ELISA (ELISET- SZÚ) – virus chřipky typu A a B, RS virus, adenoviry a viry parainfluenzy 1 a 3 (výsledek do 24 hodin od příjmu vzorku). V indikovaných případech byly použity komerční expresní diagnostické soupravy.  Následně byl proveden izolační pokus ve vhodných tkáňových kulturách se zaměřením na chřipkové i nechřipkové viry. Výsledky screeningu byly hlášeny telefonicky, kompletní výsledkový protokol pak byl zasílán po ukončení všech provedených vyšetření jednotlivým krajům.

Celkem bylo vyšetřeno 507 nazofaryngeálních výtěrů. V zaslaných materiálech jsme metodou přímé detekce antigenů a izolací infekčních agens prokázali 96 virových  respiračních agens (19%): virus chřipky subtypu A(H3N2) ve 4 případech, virus chřipky typu B v 84, viry parainfluenzy ve 4 a herpetické viry rovněž ve 4 případech.

Celkové počty vyšetřených vzorků a pozitivní záchyty (detekce + izolace) v jednotlivých krajích a v ČR celkem ukazuje tabulka 1.

Celkové počty vyšetřených vzorků a pozitivní záchyty (detekce a izolace agens) v jednotlivých KT pilotní studie (44. – 17. KT) jsou demonstrovány v grafu 1.

    

V průběhu pilotní studie jsme ze 3 krajů (Středočeský, Olomoucký a Zlínský kraj) k některým výtěrům získali i párová séra v celkovém počtu 38 vzorků (resp. dvojic sér). U  11 dvojic (29%) byl prokázán signifikantní vzestup protilátek: v 1 případě byla diagnostikována chřipka typu A, v 8 chřipka typu B a ve 2 případech infekce Mycoplasma pneumonie (viz tabulka 1).

V pilotní studii jsme se rovněž zabývali rozborem věkových skupin pacientů s pozitivním nálezem ARI. Nejvíce pozitivních záchytů (přímá detekce antigenu a izolace agens) bylo zjištěno ve věkové skupině 6-14 let (34%) a 15-24 let (33%). Podrobný přehled věkového rozložení pozitivních záchytů ARI je v tabulkách 2 a 3. 

V rámci studie jsme také hodnotili diagnózy pacientů s pozitivním nálezem ARI. Nejčastější diagnózou u záchytů přímou detekcí antigenu či izolací agens byla dg. J06  - Akutní infekce horních dýchacích cest  (34%). Podrobněji viz tabulky 4 a 5.

 

Závěr

 

Pilotní studie probíhá již druhým rokem a získané výsledky potvrzují schopnost zajistit sběr a vyšetření klinického materiálu po dobu celé epidemické sezóny dle kritérií stanovených pokynem hlavního hygienika ČR. Stejně jako v loňském roce byly získány izoláty viru chřipky z různých oblastí republiky, což zvláště v letošní sezóně s velmi netypickým výskytem viru chřipky umožnilo lépe monitorovat cirkulaci tohoto viru na území České republiky.

V letošní sezóně byla pro svoz vzorků využita kurýrní služba TNT, která byla hrazena z prostředků SZÚ (cca 140 000,- Kč). Služby této společnosti nebyly však vždy optimální (do některých lokalit kurýrní služba nejezdila a tím se prodlužovala doba transportu). SZÚ zajistil bezplatné vyšetření materiálu, poskytl transportní média a kompletní obalový materiál včetně chladících vložek.

 

Jaké jsou výhledy do příští sezóny?

 

  1. Pokud by se kurýrních služeb využívalo i příští sezónu, nebude už možné, aby je finančně zajišťoval SZÚ. Je tedy otázkou, jak svoz organizovat. Nabízí se využití možnosti sanitních vozů, neboť některé kraje do Prahy vypravují různé zásilky každý týden a bylo by možné je využít i pro tento účel. Kurýrních služeb lze využívat i nadále ať s TNT či s jiným dopravcem, avšak náklady by již hradil odesílatel.
  2. Obě NRL jsou schopny i nadále zajistit vyšetřování, není však ekonomicky únosné vyšetření hradit pouze z rozpočtu laboratoří, pokračování v tomto programu by předpokládalo finanční subvenci. 
  3. Podle současných požadavků ECDC na zajištění celoroční surveillance považujeme za nezbytné stávající program udržet a dále rozvíjet. Finanční zajištění programu by mělo být trvalé, aby umožňovalo průběžné plnění aktivit nezbytných pro sledování ARI/ILI v ČR,  pro řádné plnění NPP a v neposlední řadě pro naše uplatnění v mezinárodních projektech.

 

 

Tabulka   1         VÝSLEDKY VYŠETŘENÍ ARI V JEDNOTLIVÝCH KRAJÍCH - PILOTNÍ STUDIE 2005/2006

 

Kraj

 

 

 

 

Město

 

 

 

 

 

Detekce a izolace agens 

(nazofaryngeální výtěry)

Detekce protilátek

(párová séra)

Agens

Počet vyšetření

pozit./celk.

 

Agens

Počet vyšetření

pozit./celk.

 

A

 

B

 

RSV

 

AV

 

PIV

 

HV

 

A

 

B

 

RSV

 

AV

 

PIV

 

MP

 

Středočeský

Benešov

-

1

-

-

-

-

5/57

-

-

-

-

-

-

4/15

Kolín

1

-

-

-

-

-

1

1

-

-

-

1

Sázava

-

1

-

-

-

-

-

1

-

-

-

-

Kostelec n.ČL

-

1

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Brandýs n. L

1

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Jihočeský

Č.Krumlov

-

-

-

-

1

-

9/47

-

-

-

-

-

-

0/0

Jindř. Hradec

-

3

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Písek

-

-

-

-

-

1

-

-

-

-

-

-

Prachatice

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Nová Včelnice

-

1

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Tábor

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Č.Budějovice

-

3

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Karlovarský

Cheb

-

5

-

-

-

-

8/31

-

-

-

-

-

-

0/0

Sokolov

-

2

-

-

1

-

-

-

-

-

-

-

Ústecký

Ústí n. Labem

-

4

-

-

-

1

5/43

-

-

-

-

-

-

0/0

Liberecký

Liberec

1

3

-

-

-

-

11/56

-

-

-

-

-

-

0/0

Č. Lípa

-

1

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Jablonec

-

6

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Semily

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Královéhradecký

Hradec Král.

-

8

-

-

-

1

9/45

-

-

-

-

-

-

0/0

Pardubický

Pardubice

-

10

-

-

-

-

10/42

-

-

-

-

-

-

0/0

Vysočina

Jihlava

-

8

-

-

2

-

10/41

-

-

-

-

-

-

0/0

Jihomoravský

Brno

-

4

-

-

-

-

7/46

-

-

-

-

-

-

0/0

Vyškov

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Blansko

-

1

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Hodonín

-

1

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Znojmo

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Kuřim

-

1

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Olomoucký

Olomouc

-

-

-

-

-

-

4/34

-

-

-

-

-

-

0/2

Prostějov

-

4

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Zlínský

Vsetín

-

4

-

-

-

-

4/29

-

6

-

-

-

1

7/21

Zlín

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Moravskoslezský

Ostrava

1

12

-

-

-

1

14/36

-

-

-

-

-

-

0/0

Celkem

4

84

0

0

4

4

96/507

1

8

0

0

0

2

11/38

Podíl infekčních agens v %

0,8

16,6

0,0

0,0

0,8

0,8

19

2,6

21

0,0

0,0

0,0

5,3

28,9


Legenda: A = chřipka typu A, B = chřipka typu B, RSV = respirační syncytiální virus,  AV = adenoviry, API = viry parainfluenzy, HV = herpetické viry,  MP = Mycoplasma pneumoniae

 

 

Tabulka   2       VĚKOVÉ ROZLOŽENÍ ARI V PILOTNÍ STUDII

                                   - přímá detekce antigenů a izolace agens -

 

Agens

0-5

6-14

15-24

25-59

60+

Celkem

A

-

3

1

-

-

4

B

9

28

27

16

4

84

RSV

-

-

-

-

-

-

AV

-

-

-

-

-

-

PIV

-

-

3

-

1

4

HV

-

2

1

1

-

4

Celkem

9

33

32

17

5

96

 

 

 

Tabulka   3       VĚKOVÉ ROZLOŽENÍ ARI V PILOTNÍ STUDII

                                 - detekce protilátek v párových sérech -

 

Agens

0-5

6-14

15-24

25-59

60+

Celkem

A

-

-

1

-

-

1

B

-

3

4

1

-

8

RSV

-

-

-

-

-

-

AV

-

-

-

-

-

-

PIV

-

-

-

-

-

-

MP

-

1

1

-

-

2

Celkem

-

4

6

1

-

11

 

 

 

Tabulka   4       DIAGNÓZY ARI V PILOTNÍ STUDII

                         - přímá detekce antigenů a izolace agens -

 

Agens

B349

J00

J01

J02

J03

J04

J06

J11

J20

R509

Celkem

A

2

-

-

-

-

-

-

1

1

-

4

B

13

3

3

10

3

6

30

12

3

1

84

RSV

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

AV

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

PIV

-

-

-

1

-

-

2

1

-

-

4

HV

-

-

-

-

1

-

1

2

-

-

4

Celkem

15

3

3

11

4

6

33

16

4

1

96

 

 

 

Tabulka   5       DIAGNÓZY ARI V PILOTNÍ STUDII

- detekce protilátek v párových sérech –

 

Agens

B349

J00

J01

J02

J03

J04

J06

J11

J20

R509

Celkem

A

-

-

-

-

-

-

-

-

1

-

1

B

-

-

-

1

-

3

2

1

1

-

8

RSV

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

AV

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

PIV

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

MP

-

-

-

-

-

-

1

-

1

-

2

Celkem

-

-

-

1

-

3

3

1

3

-

11

 

                                                                          

 

 

   RNDr. Marie Otavová

                                                                              MUDr. Martina Havlíčková, CSc.

                                                                             SZÚ - CEM