SARS-CoV-2: metodický pokyn zajištění vzorků pro celogenomovou sekvenaci
18. březen 2021 | RNDr. Helena Jiřincová NRL pro chřipku a nechřipková virová respirační onemocnění
Zpráva NRL
Pro funkční molekulární surveillance NRL prosí o spolupráci jednotlivé KHS či vyšetřující laboratoře ve smyslu zajištění pravidelného zasílání vzorků podezřelých na přítomnost mutací k celogenomové sekvenaci.
Celogenomová sekvenace (WGS) virových vzorků je v současnosti jedinou efektivní cestou monitoringu epidemické situace, kdy se objeví ohnisko charakterizované změnou jedné z proměnných, které používáme pro sledování epidemie. NRL opakovaně apeluje na nutnost sběru vzorků k sekvenaci z takovýchto ohnisek. Jedná se o včasné zachycení variant s potenciálem ovlivnit epidemickou situaci, zhoršit průběh onemocnění nebo uniknout vakcinaci. Signály pro zaslání vzorků na sekvenaci jsou:
- Zvýšení R v lokálních ohniscích. Rychlé šíření je prvním signálem.
- Nakupení výsledků s nízkými hodnotami Ct v oblasti/ohnisku (Ct < 16).
- Zvýšení podílu inaparentních průběhů infekce s jasnou pozitivitou Ct < 26.
- Pacienti s atypickými klinickými projevy, neobvyklé pozitivní materiály (např. plná krev, liquor)
- Osoby mladší 50 let bez významných komorbidit v těžkém stavu.
- Hospitalizované děti mladší 16 let.
- Aktuálně se navrátivší osoby z různých zemí s rychlým šířením onemocnění či s vyšším podílem závažných stavů
- Pozitivní PCR s Ct < 30 po vakcinaci.
- V případě, že je situace v kraji stabilní, dodává každý kraj do NRL 5 materiálů za týden, a to odebraných do 5. dne od nástupu klinických příznaků a s Ct do hodnoty 26.
Je velmi důležité zasílat materiály od mladých pacientů v těžkém stavu.
V případě slabé pozitivity v materiálech z HCD je nutné vyšetřit materiál z DCD - endotracheální aspirát, BAL, apod., kde mohou být hodnoty Ct nižší!
Každý zasílaný vzorek musí být vybaven kopií COVID-19 elektronické žádanky, kopií laboratorního výsledku s uvedenými hodnotami Ct, se shrnutím epidemické (import z ciziny, reinfekce, infekce po vakcinaci) a klinické anamnézy (inaparentní/lehké onemocnění, závažný stav – UPV apod.) a v případě importu i údaji o destinaci.
Na žádance musí být jasně specifikován požadavek, musí být specifikována kontaktní osoba, včetně telefonního kontaktu.
Vzorek musí být zasílán nejpozději 3 dny od dodání do laboratoře, takto:
- Bez zamrazení v laboratoři, uchovávání i transport při + 2 až + 8 °C
- Pokud je vzorek v laboratoři již zamrazen, nesmí během dopravy rozmrznout.
Dodání vzorků do 10 Ks – standardní pathopack.
Dodání vzorků nad 10 ks – maximálně 50 zkumavek: ve stojánku a v transportním pathopacku pro zkumavky ve stojánkách, NRL zapůjčí za účelem transportu tyto obaly.
U všech vzorků, které budou dodány bez žádanky, bez doplněných hodnot Ct se prodlužuje doba provedení celogenomové sekvenace.
RNDr. Helena Jiřincová
NRL pro chřipku a nechřipková virová respirační onemocnění